[发明专利]胞外段为Vδ2(OT3)Vγ9的CAR分子及表达该分子的CAR-T细胞及其用途

权利要求书

1.一种表达胞外段为Vδ2(OT3)Vγ9的CAR分子的CAR-T细胞，命名为Vδ2(OT3)Vγ9CAR-αβT细胞，所述CAR分子包括胞外段、跨膜段和胞内段；其中所述胞外段位于αβT细胞外，包含γδTCR的γ9链可变区(简称Vγ9)和与Vγ9连接的CDR3区被OT3多肽置换的δ2链的可变区(简称Vδ2(OT3))，所述跨膜段贯穿αβT细胞的细胞膜，用于连接胞外段中的Vγ9和胞内段，所述胞内段位于αβT细胞内。

2.根据权利要求1所述的Vδ2(OT3)Vγ9CAR-αβT细胞，所述跨膜段为CD8a分子，所述胞内段包含CD28、CD137及CD3分子的zeta链(CD3z)。

3.根据权利要求1或2所述的Vδ2(OT3)Vγ9CAR-αβT细胞，其还以自分泌形式同时表达细胞因子IL-7和/或趋化因子CCL19。

4.一种CAR分子，其包括胞外段、胞内段和连接两者的跨膜段，其中所述胞外段包含与跨膜段相连的γδTCR的γ9链可变区(Vγ9)，和与Vγ9连接的CDR3区被OT3多肽置换的δ2链的可变区(Vδ2(OT3))。

5.根据权利要求4所述的CAR分子，其中所述跨膜段为CD8a分子，所述胞内段包含CD28、CD137及CD3分子的zeta链(CD3z)。

6.权利要求4或5所述的CAR分子的编码基因，其包含分别编码所述CAR分子的胞外段、跨膜段和胞内段的基因片段，其中编码所述胞外段的基因片段的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，编码所述跨膜段的基因片段的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示，编码所述胞内段的基因片段的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。

7.根据权利要求6所述的CAR分子的编码基因，其还在编码所述胞内段的基因片段的下游连接有细胞因子IL-7和/或趋化因子CCL19的编码基因，其中所述细胞因子IL-7的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示，所述趋化因子CCL19的编码基因的核苷酸序列如SEQID NO:5所示。

8.一种携带权利要求6或7所述的CAR分子的编码基因的重组质粒。

9.权利要求1-3中任一项所述的Vδ2(OT3)Vγ9CAR-αβT细胞、或权利要求4或5所述的CAR分子、或权利要求8所述的重组质粒在制备抗肿瘤细胞制剂中的用途；

优选地，所述抗肿瘤细胞制剂还包含治疗有效量的IL-2。

10.根据权利要求9所述的用途，其中所述肿瘤为实体肿瘤，优选为喉癌、肺癌、肝癌、卵巢癌、直肠腺癌、结肠癌、结直肠癌、肺鳞癌、B淋巴细胞瘤。