[发明专利]一种靶向TRBC1的人源化嵌合抗原受体、T细胞及用途

说明书

本发明公开了一种靶向TRBC1的人源化嵌合抗原受体、T细胞及用途，所述的嵌合抗原受体包含scFv，scFv序列来自于鼠源抗体JOVI.1，鼠源抗体JOVI.1的CDR区移植到人源抗体框架VH1_1‑02和VK2_A17。本发明提供了抗体序列人源化、特异性识别并杀伤TRBC1+T细胞的CAR‑T产品，对于不表达TRBC1的正常细胞(包括表达TRBC2的正常T细胞)，几乎不存在非特异性杀伤的情况，从而保留患者正常的细胞免疫功能，避免患者出现免疫低下或缺失的情况。

技术领域

本发明涉及生物医药技术领域，具体涉及一种靶向TRBC1的人源化嵌合抗原受体、T细胞及用途。

背景技术

CAR-T细胞疗法(Chimeric Antigen Receptor T-Cell therapy)，即嵌合抗原受体T细胞免疫疗法，是将特异性抗体的单链抗原识别序列(scFv)与CD3ζ的穿膜区及包内信号序列相连，并表达于T细胞，使其具有不依赖于MHC分子的、特异性识别肿瘤抗原并杀伤肿瘤靶细胞的功能。

2011年，美国宾夕法尼亚大学Carl June教授团队的CAR-T疗法在3例慢性淋巴细胞白血病(CLL)患者的治疗中获得突破：融合4-1BB(CD137)共刺激结构域的二代CAR-T细胞在患者体内实现了有效的靶细胞杀伤和长期增殖；2012年，Carl June团队使用该CAR-T产品治疗对放化疗无反应的急性淋巴细胞性白血病(ALL)患者、“明星小女孩”Emily，使其病情得到了奇迹般的控制：白血病完全缓解，其至今仍保持着无癌生存。

2017年，美国食品药品管理局(FDA)批准上市了两款适用于复发难治性B细胞肿瘤的CAR-T产品，表明了社会对该新兴肿瘤治疗方法的认可与期待。

据世界卫生组织(WHO)统计，全球淋巴瘤发病年增长率为7.5％，是目前发病率增长最快的恶性肿瘤之一，全球每年约有35万新发病例，死亡人数超过20万。近年来，我国淋巴肿瘤的发病率也呈逐年上升趋势，目前我国该疾病发病率超过6.68/10万人，且多发于儿童和青壮年。若将白血病和淋巴瘤，这两大淋巴系统恶性肿瘤合并分析，我国每年恶性淋巴瘤的发病率约为25/12万，即每年大约有20万人罹患淋巴瘤或白血病，给百姓的生命健康带来了巨大威胁。

恶性淋巴瘤患者中，非霍奇金淋巴瘤发生比例约占90％以上，其中我国T淋巴瘤患者约占所有非霍奇金淋巴瘤的25％，高于欧美国家的约15％。T细胞淋巴瘤(T celllymphoma)是一种侵袭性强，进展快，且对放化疗反应率低，预后差，复发率高的淋巴系统恶性肿瘤，平均5年生存率不足25％。目前，该疾病尚无明确有效的标准治疗方案，且缺乏靶向治疗药物。因此，探索其更为安全有效的治疗方案，是国内外临床与科研机构共同努力的方向。

目前正在进行临床或前临床实验的CAR-T产品大多靶向B细胞来源肿瘤如淋巴瘤、白血病和多发性骨髓瘤等，靶向T细胞淋巴瘤的CAR-T产品却鲜有报道。其中，主要的困难点包括：

1.缺乏合适的肿瘤相关抗原作为靶点。由于肿瘤T细胞来源于变异的T细胞，其表面抗原与正常T细胞基本相似，缺乏特异性的肿瘤抗原。目前已见报道的，适用于T细胞淋巴瘤的CAR-T产品，或靶向T细胞共同抗原(如CD5,CD3,CD7等)，在杀伤肿瘤T细胞的同时也会杀伤患者的正常T细胞，导致患者发生获得性免疫缺失或低下；或靶向T细胞亚群的表面抗原(如CD4,CD30,CCR4等)，适用范围相当有限，并存在抗原缺失、肿瘤逃逸的风险；同时，由于存在CAR-T细胞同时表达抗原的情况，还会导致CAR-T之间的“自相残杀”，降低CAR-T细胞的功能活性，影响其持续作用。

2.在以自体淋巴细胞制备CAR-T细胞的过程中，需严格避免肿瘤T细胞的污染：若在制备的CAR-T中混入了肿瘤细胞，由于CAR上识别肿瘤抗原的单链抗体序列(scFv)会与细胞自身表达的抗原结合，使其不能被其他的CAR-T细胞识别，从而导致肿瘤细胞的“逃逸”与肿瘤的复发，这样的案例已在CD19 CAR-T产品的临床实践中出现过；若以异体淋巴细胞制备CAR-T细胞，则需考虑免疫排斥问题。