[发明专利]一种重组烟曲霉抗原蛋白及其应用

权利要求书

1.一种重组烟曲霉抗原蛋白，其特征在于，所述重组烟曲霉抗原蛋白包括烟曲霉抗原的Asp f1肽段、Asp f2肽段、Asp f3肽段、Asp f4肽段和Asp f6肽段；所述重组烟曲霉抗原蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.6所示。

2.一种抗烟曲霉的IgE抗体检测试剂盒，其特征在于，所述抗烟曲霉的IgE抗体检测试剂盒包括权利要求1所述的重组烟曲霉抗原蛋白。

3.根据权利要求2所述的抗烟曲霉的IgE抗体检测试剂盒，其特征在于，所述重组烟曲霉抗原蛋白包括生物素标记重组烟曲霉抗原蛋白；

所述生物素包括N-羟基磺酸基琥珀生物素。

4.根据权利要求3所示的抗烟曲霉的IgE抗体检测试剂盒，其特征在于，所述抗烟曲霉的IgE抗体检测试剂盒还包括磁微粒和/或抗IgE抗体；

所述磁微粒包括链霉亲和素标记磁微粒；

所述抗IgE抗体包括吖啶磺酰胺标记抗IgE抗体。

5.根据权利要求4所示的抗烟曲霉的IgE抗体检测试剂盒，其特征在于，所述抗烟曲霉的IgE抗体检测试剂盒还包括校准品；

所述校准品包括低值校准品和/或高值校准品；

所述低值校准品包括人源抗烟曲霉的IgE抗体，浓度为0.2～0.8IU/mL；

所述高值校准品包括人源抗烟曲霉的IgE抗体，浓度为25～35IU/mL；

所述抗烟曲霉的IgE抗体检测试剂盒还包括清洗液、激发液、样本稀释液或质控品中的任意一种或至少两种的组合。

6.一种权利要求2-5任一项所述的抗烟曲霉的IgE抗体检测试剂盒的制备方法，其特征在于，所述制备方法包括生物素标记重组烟曲霉抗原蛋白和吖啶磺酰胺标记抗IgE抗体的步骤。

7.根据权利要求6所述的抗烟曲霉的IgE抗体检测试剂盒的制备方法，其特征在于，所述生物素标记重组烟曲霉抗原蛋白包括生物素标记和透析的步骤；

所述标记前还包括将所述生物素和重组烟曲霉抗原蛋白配制成生物素溶液和重组烟曲霉抗原蛋白溶液的过程；

所述生物素溶液的浓度为0.2～1μg/mL；

所述重组烟曲霉抗原蛋白溶液的浓度为0.8～1.2μg/mL；

所述生物素溶液与重组烟曲霉抗原蛋白溶液的体积比为1:(45～55)。

8.根据权利要求7所述的抗烟曲霉的IgE抗体检测试剂盒的制备方法，其特征在于，所述重组烟曲霉抗原蛋白溶液的溶剂包括PBS缓冲液，所述PBS缓冲液的浓度为0.01～0.03M；

所述标记在避光条件下进行；

所述标记的时间为1.5～2.5h；

所述透析使用的液体包括PBS缓冲液，所述PBS缓冲液的浓度为0.01～0.03M；

所述透析的过程中对透析使用的液体进行搅拌，所述搅拌包括磁力搅拌器搅拌；

所述透析在2～8℃下进行；

所述透析的时间为8～12h；

所述透析的过程中换液5～8次，所述换液的间隔时间为2～3h；

所述换液的体积为0.8～1.2L；

所述透析后还包括对透析产物进行保存的步骤；

所述透析产物保存在甘油溶液中，所述甘油溶液的浓度为18％～25％；

所述保存在密封避光条件下进行，所述保存的温度不高于-20℃。

9.根据权利要求8所述的抗烟曲霉的IgE抗体检测试剂盒的制备方法，其特征在于，所述生物素溶液的浓度为0.5μg/mL；

所述重组烟曲霉抗原蛋白溶液的浓度为1μg/mL；

所述生物素溶液与重组烟曲霉抗原蛋白溶液的体积比为1:50；

所述标记的时间为2h；

所述换液的体积为1L；

所述甘油溶液的浓度为20％。