[发明专利]月季花药材指纹图谱及其构建方法和月季花药材的质量检测方法

权利要求书

1.一种月季花药材指纹图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤，

（1）月季花供试品溶液的制备；包括：

1）称取月季花药材，加水提取，得到提取液；

2）将提取液固液分离，取液体干燥，得到提取物；

3）取提取物加入甲醇，提取，固液分离，取液体，即为供试品溶液；

（2）取月季花供试品溶液采用高效液相色谱法检测，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以含体积百分数为0.1%-0.15%甲酸的水溶液为流动相B，以乙腈为流动相A，梯度洗脱，梯度洗脱程序包括：0→10分钟，流动相A的体积百分比为15%→17%，流动相B的体积百分比为85%→83%；10→22分钟，流动相A的体积百分比为17%→18%，流动相B的体积百分比为83%→82%；22→35分钟，流动相A的体积百分比为18%→30%，流动相B的体积百分比为82%→70%；35分钟→50分钟，流动相A的体积百分比为30%→100%，流动相B的体积百分比为70%→0%。

2.根据权利要求1所述的构建方法，其特征在于，步骤（1）满足如下A-C中的任意一项或者多项：

A、步骤1）中，加入10-40倍量水，提取方式为回流提取或者超声提取，提取时间为0.5-5h；

B、步骤2）和3）中，所述固液分离独立地选自离心或者过滤；

C、步骤3）中，加入月季花药材50-200倍量甲醇，提取方式为回流提取或者超声提取，提取时间为0.5-5h。

3.根据权利要求1或2所述的构建方法，其特征在于，步骤（2）高效液相色谱法的色谱条件还包括：检测波长为304-379nm，流速为0.8-1.2ml/min，柱温20-40℃，进样量为2-20μl。

4.根据权利要求1或2所述的构建方法，其特征在于，所述的构建方法还包括采用金丝桃苷、异槲皮苷、鞣花酸、槲皮苷中的至少一种制备对照品溶液的步骤，以及按照1或2所述的构建方法中的高效液相色谱法检测对照品溶液得到对照品指纹图谱的步骤。

5.根据权利要求4所述的构建方法，其特征在于，所述对照品溶液的制备方法包括如下步骤：取金丝桃苷、异槲皮苷对照品，加溶剂制成每1ml含金丝桃苷0.005-0.02mg、异槲皮苷0.005-0.02mg的对照品A溶液，取鞣花酸对照品加溶剂制成每1ml含鞣花酸0.1-0.5mg的对照品B溶液，取槲皮苷对照品加溶剂制成每1ml含槲皮苷0.3-0.8mg的对照品C溶液。

6.根据权利要求5所述的构建方法，其特征在于，所述溶剂选自正己烷、甲醇水溶液或者纯甲醇；所述甲醇水溶液中甲醇的体积分数不小于60%。

7.权利要求1-6中任一项所述的月季花药材指纹图谱的构建方法在月季花药材产品的质量检测和/或鉴别中的用途。