[发明专利]一种人的染色体探针和荧光染色核型试剂盒的设计方法及应用

说明书

本发明涉及一种人的染色体探针和荧光染色核型试剂盒的设计及应用方法，利用人类参考基因组序列设计了一批能够用于人类染色体显带的寡核苷酸探针，并基于该寡核苷酸探针，发明了染色体荧光染色核型试剂盒，利用该试剂盒处理后的染色体染色后，可以观察到染色体上出现明显的带型丰富的红绿信号带型，基于染色体信号的分布特征，可区分同源染色体，能够高效的进行染色体核型分析。本发明方法操作简单、快捷、高效、经济，具有带型清晰、多色、容易识别的优点，能够更低成本地完成染色体核型观察实验，为人类染色体异常筛选、临床医学检验提供了有利的帮助，是人类染色体鉴定常用G显带技术潜在的替代技术。

技术领域

本发明涉及一种人的染色体探针和荧光染色核型试剂盒的设计及应用方法， 属于染色体核型鉴定技术领域。

背景技术

人染色体呈线性排列，其中包括很多的重复序列，染色体在细胞核内以三维空间折叠的 形式存在。虽然染色质组织的结构变化是遗传多样性的重要来源，但细胞染色体的遗传变异 也是很多人类疾病的重要基础。染色体核型分析是细胞遗传学的重要研究手段，在临床多种 疾病如染色体病、白血病、肿瘤等的诊断及研究中具有重要意义。对染色体结构的研究方法 始于半个世纪以前吉姆萨染色法-G显带技术。目前，G显带技术仍是广泛使用的一种方法， G显带是染色体经胰蛋白酶处理后，用一种能结合DNA的化学染料吉姆萨染色，使染色体呈 深浅不同的带型的方法。但G显带的计数标准较为苛刻，染色体彼此间需无交联缠绕，同时 对检验人员要求有较高的经验基础。

利用人类基因组参考序列，通过生物信息学分析，我们开发了一批人类寡核 苷酸探针，这些探针能够稳定在人类染色体上产生带信号，能够用于人类染色体 核型分析。我们发现，寡核苷酸通常情况下很难侵入到人类染色体中，但能够快 速侵入到经过特殊预处理的人类染色体中。并且适当长度的寡核苷酸探针可以在 极低的浓度侵入到染色体，因此可以通过荧光探针染色产生带型。该原理为我们 利用新开发的人类寡核苷酸探针发明核型探针染色试剂盒，建立新的荧光探针显 带方法替代G显带染色进行人类染色体核型分析提供了新思路。

发明内容

针对现有技术的不足，本发明的目的是提供一种人的染色体探针和荧光染色 核型试剂盒的设计及应用方法，利用人类参考基因组序列设计了一批能够用于人 类染色体显带的寡核苷酸探针，并基于寡核苷酸探针，发明了人类染色体荧光染 色核型试剂盒，该试剂盒能够高效的进行人类染色体核型分析，是潜在的替代G 显带技术的新的人类染色体鉴定方法。

为了实现上述目的，本发明所采用的技术方案是：

一种人的染色体探针系列，具体序列如下所示：

Oligo Human-1：

FAM-5′-GAATGGAATGGAATGGAATGGAATGGAATGGAATG-3′；

Oligo Human-2：

FAM-5′-ATTCCATTCCATTCCATTCCATTCCATTCCATTCC-3′；

Oligo Human-9：

FAM-5′-AATGGAATGGAATCGAATGGAATGGAATCGAATGGAATGGAATCG- 3′；

Oligo Human-14：

FAM-5′-ATTCCATTTCATTCCATTCCATTCCATTTCATTCCATTCC-3′；

Oligo Human-17：

FAM-5′-AGCCAAGCCAGCCAAGCCAGCCAAGCCAGCCAAGCCAGCCAAGC C-3′；

Oligo Human-22：