[发明专利]一种检测LPCAT1基因表达量的引物探针组、试剂盒及其检测方法

说明书

本发明公开了一种检测LPCAT1基因表达量的引物探针组，包括组分A和组分B；组分A包括SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的上游引物LPCAT1‑FP，SEQ ID NO.2所示核苷酸序列的下游引物LPCAT1‑RP，含有SEQ ID NO.3所示核苷酸序列的探针LPCAT1‑probe，组分B包括SEQ ID NO.4所示核苷酸序列的上游引物ABL1‑FP，SEQ ID NO.5所示核苷酸序列的下游引物ABL1‑RP，含有SEQ ID NO.6所示核苷酸序列的探针ABL1‑probe。本发明还公开了包含该引物探针组的检测试剂盒及其检测方法。本发明实现了细胞中LPCAT1相对表达量的定量检测，灵敏度高，结果精准、可靠性高，为血液肿瘤细胞提供了一种新的辅助诊断方法和辅助鉴定方法，具有很大的市场应用前景。

技术领域

本发明涉及生化检测领域，尤其是涉及一种检测LPCAT1基因表达量的引物探针组；本发明还涉及包括该引物探针组的用于检测LPCAT1基因表达量的试剂盒；进一步的，本发明还涉及采用该试剂盒定量检测LPCAT1基因表达量的方法。

背景技术

LPCAT1（Lysophosphatidylcholine Acyltransferase 1）是一种编码基因，其编码的蛋白质是1-酰基-sn-甘油-3-磷酸酰基转移酶家族的成员之一，其在磷脂代谢中发挥作用，特别是在酰基辅酶A存在下将溶血磷脂酰胆碱转化为磷脂酰胆碱。 这个过程在合成肺表面活性剂和血小板活化因子（PAF）中很重要。此外，该基因的表达升高可能促进口腔鳞状细胞癌，前列腺癌，乳腺癌和其他人类癌症的进展。

目前在实体肿瘤领域，LPCAT1基因表达量的检测多采用SYBR Green相对定量方法，这种方法只需要设计基因的上下游引物、无须探针即可检测，但需要对照样本的存在，才能计算目的样本的基因相对表达量。而目前在临床应用的AML（急性髓系白血病，AcuteMyeloid Leukemia，AML）中基因定量方法多采用TaqMan方法，这种检测方法除设计基因的上下游引物外、还需要设计基因的特异性探针，但无须对照样本的存在，即可测量样本的基因相对表达量，更适合精确定量，广泛用于疾病的诊断、微小残留病灶监测和复发进展的监测。因此，现有的在实体肿瘤中应用的LPCAT1基因定量方法无法满足AML领域的需求，因此有必要研发适合AML的LPCAT1基因定量检测方法。

目前尚未见LPCAT1与急性髓系白血病（Acute Myeloid Leukemia，AML）之间相关的研究报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种检测LPCAT1基因表达量的引物探针组；本发明还提供包括该引物探针组的用于检测LPCAT1基因表达量的试剂盒；进一步的，本发明还提供采用该试剂盒定量检测LPCAT1基因表达量的方法。

为实现上述目的，本发明可采取下述技术方案：

本发明所述的检测LPCAT1基因表达量的引物探针组，包括组分A和组分B；

所述组分A包括：

SEQ ID NO.1所示核苷酸序列的上游引物LPCAT1-FP，

SEQ ID NO.2所示核苷酸序列的下游引物LPCAT1-RP，

和含有SEQ ID NO.3所示核苷酸序列的探针LPCAT1-probe，所述探针LPCAT1-probe的5’端标记有FAM发光基团，3’端标记有荧光淬灭基团BHQ；

所述组分B包括：

SEQ ID NO.4所示核苷酸序列的上游引物ABL1-FP，

SEQ ID NO.5所示核苷酸序列的下游引物ABL1-RP，

以及含有SEQ ID NO.6所示核苷酸序列的探针ABL1-probe，所述探针ABL1-probe的5’端标记有FAM发光基团，3’端标记有荧光淬灭基团TAMRA。

本发明所述的一种检测LPCAT1基因表达量的试剂盒，包括本发明所述的引物探针组。