[发明专利]体外增殖自然杀伤细胞的方法在审
| 申请号： | 202110149148.1 | 申请日： | 2021-02-03 |
| 公开（公告）号： | CN113604432A | 公开（公告）日： | 2021-11-05 |
| 发明（设计）人： | 戴承正 | 申请（专利权）人： | 南方草生物科技股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783 |
| 代理公司： | 北京华夏正合知识产权代理事务所(普通合伙) 11017 | 代理人： | 韩登营;荣文英 |
| 地址： | 中国台*** | 国省代码： | 台湾;71 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 体外 增殖 自然 杀伤 细胞 方法 | ||
1.一种体外增殖周边血液单核细胞中自然杀伤细胞的方法，包括下列步骤：
(a)取得一个体的一周边血液样本；
(b)由所述周边血液样本取得一血浆及一周边血液单核细胞；
(c)使用第一培养基将所述周边血液单核细胞的浓度调整为第一浓度后接种并培养5天，其中所述第一培养基包含所述个体的一血浆；
(d)去除上一步骤的培养基，使用第二培养基将所述周边血液单核细胞的浓度调整为所述第一浓度后接种并培养2天，其中，所述第二培养基包含所述血浆及白介素-2，所述白介素-2的浓度为0.3μg/mL至0.5μg/mL；及
(e)重复步骤(d)约2至5次，直至所述周边血液单核细胞增殖至所需数量。
2.如权利要求1所述的方法，其中所述个体是人类。
3.如权利要求1所述的方法，其中所述个体是健康个体或肿瘤患者。
4.如权利要求1所述的方法，其中所述血浆在使用前经灭活。
5.如权利要求1所述的方法，其中所述第一浓度为1x106细胞/mL。
6.如权利要求1所述的方法，其中所述白介素-2的浓度为0.368μg/mL。
7.如权利要求1所述的方法，其中步骤(d)是接种于一细胞培养袋或一培养皿。
8.如权利要求1所述的方法，其中经步骤(e)增殖的所述周边血液单核细胞中，所述自然杀伤细胞的数量占61.2％或以上。
9.如权利要求1至8任一项所述的方法，其中，由所述方法得到的所述自然杀伤细胞在细胞培养第10至14天可用于制备一医药组成物。
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