[发明专利]针对人GPR48的单克隆抗体及其应用

说明书

本发明公开了一种针对人GPR48的单克隆抗体及其应用。本发明所提供的抗体，穷轻链可变区中LCDR1、LCDR2和LCDR3的氨基酸序列依次如SEQ ID No.1的第27‑32位、第50‑52位、第89‑97位所示，重链可变区中HCDR1、HCDR2和HCDR3的氨基酸序列依次如SEQ ID No.2的第26‑33位、第51‑60位、第99‑108位所示。该抗体与GPR48蛋白有极强的特异性和敏感性，可应用于免疫印迹，免疫荧光和免疫组化等免疫学实验技术中；可应用于流式细胞分析和流式细胞分选等流式细胞学实验技术中；可应用于研究亚细胞定位，蛋白相互作用等信号通路的科学研究中。该抗体可用于人体GPR48阳性肿瘤如结直肠癌的临床药物开发。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种针对人GPR48的单克隆抗体及其应用。

背景技术

结直肠癌是常见的恶性肿瘤之一，是全球位居第三的致死性肿瘤。肿瘤的靶向治疗是近些年发展起来的治疗癌症的新方法，它很大程度上避免了传统癌症疗法如手术治疗、化疗和放疗所带来的肿瘤细胞扩散和严重毒副作用的产生。而针对肿瘤细胞表面抗原而进行的单克隆抗体治疗是肿瘤靶向治疗的主要方式，表现出了良好的肿瘤治疗效果。

G蛋白偶联受体48(G Protein-Coupled Receptor 48,GPR48)，又称Leucine RichRepeat Containing G Protein-Coupled Receptor 4,GPR48，是一种广泛表达于真核生物细胞表面的7次跨膜蛋白，共有951个氨基酸，其中N端位于细胞膜外，C端7次跨膜，分子量约为104KD。编码人GPR48的基因由106,827个碱基组成，位于11号染色体p14.1区域。与经典G蛋白偶联受体不同，GPR48不通过激活G蛋白异源三聚体介导下游信号通路。GPR48激活经典Wnt信号通路，参与多种器官的发育。根据本实验室的前期研究和其他文献报道，我们发现G蛋白偶联受体48与结直肠等多种恶性肿瘤的发生和发展有密切关系，其主要特征为，(1)G蛋白偶联受体48在结直肠癌、前列腺癌、胃癌、肺癌、乳腺癌等多种癌症组织中高表达；(2)G蛋白偶联受体48在结直肠癌、前列腺癌、胃癌、肺癌、乳腺癌等多种癌症组织中与人细胞型朊蛋白PrPc共表达；(3)动物模型中，敲低G蛋白偶联受体48显著抑制结直肠肿瘤生长和肝转移；(4)表达外源G蛋白偶联受体48显著促进肿瘤发生和生长。综上所述，G蛋白偶联受体48可以作为结直肠癌、前列腺癌、胃癌、肺癌、乳腺癌等多种恶性肿瘤的治疗靶点。本发明人的前期工作也表明GPR48与PrPc共表达的细胞具有肿瘤干细胞的特性。因此，针对GPR48进行以单克隆抗体为基础的靶向性治疗研究，有望为癌症的治疗提供新的方案。

发明内容

本发明的目的是提供一种针对人GPR48的单克隆抗体及其应用。

第一方面，本发明要求保护一种抗体。

本发明要求保护的抗体为抗GPR48的单克隆抗体。所述抗体的轻链可变区中LCDR1、LCDR2和LCDR3的氨基酸序列依次如SEQ ID No.1的第27-32位、第50-52位、第89-97位所示。所述抗体的重链可变区中HCDR1、HCDR2和HCDR3的氨基酸序列依次如SEQ ID No.2的第26-33位、第51-60位、第99-108位所示。

其中，HCDR1、HCDR2和HCDR3为重链可变区中的三个互补决定区，LCDR1、LCDR2和LHCDR3为轻链可变区中的三个互补决定区。互补决定区的序列根据Kabat定义。

在本发明保护范围内，所述抗体可为全长抗体、Fab片段、F(ab’)2片段或单链Fv片段等各种形式。

进一步地，所述轻链可变区的氨基酸序列为SEQ ID No.1，或者与SEQ ID No.1具有至少90％的一致性(不一致处可在骨架区(FR))。所述重链可变区的氨基酸序列为SEQ IDNo.2，或者与SEQ ID No.2具有至少90％的一致性(不一致处可在骨架区(FR))。