[发明专利]m6

说明书

本发明公开了m⁶A RNA甲基化含量及其甲基化相关酶和结合蛋白在制备衰老检测试剂盒中的应用。本发明的衰老检测试剂盒通过检测m⁶A RNA甲基化含量、RNA甲基化酶METTL3、METTL14、WTAP和KIAA1429，m⁶A RNA去甲基化酶FTO和ALKBH5以及m⁶A RNA甲基化结合蛋白YTHDC1、YTHDF1和YTHDF2蛋白表达量判断细胞衰老；而RNA甲基化酶METTL3高表达还是低表达用于鉴定细胞早衰还是正常的复制性衰老。本发明可用于早衰、复制性衰老以及衰老相关疾患的评估，具有广阔的应用前景。

技术领域

本发明涉及生物医学技术领域，特别涉及m⁶A RNA甲基化含量及其甲基化相关酶和结合蛋白在制备衰老检测试剂盒中的应用。

背景技术

细胞衰老，即复制性衰老，是一个复杂的生物学过程，细胞生理功能渐进性失调，增殖衰退，细胞周期永久性阻滞。细胞衰老与许多年龄相关疾患的发生发展密切相关，如动脉粥样硬化、骨关节炎、阿尔茨海默病、老年性黄斑变性、2型糖尿病和癌症等等，细胞呈现一种慢性及低度的非细菌性炎症状态。外源性环境因素，如紫外线、化疗等可加速细胞衰老的进程，引起急性衰老现象发生，即为早衰。早衰的发生，更早的使人体伴随着机体器官功能下降，使年龄相关疾病的风险增加，降低人们的生活质量。

目前，在细胞衰老研究中涉及的检测指标包括衰老相关的β-半乳糖苷酶、端粒和端粒酶、衰老相关的异染色质灶、衰老相关的分泌表型、活性氧簇以及肿瘤抑制基因p53和p16等。这些检测指标在衰老研究中被广泛应用，各具特点。然而，关于细胞早衰的检测和鉴定，目前尚无相关专利报道。

细胞早衰与复制性衰老虽具有许多类似的表型特征，但内在调控机制存在差异。在早衰的细胞中，存在核基因组DNA甲基化和整体组蛋白修饰的规律性变化，核及线粒体表观基因组微环境不稳定，衰老相关特异基因的表观遗传学修饰的变化。其中，RNA甲基化修饰是表观遗传学崭新的研究领域，m⁶A RNA 甲基化是RNA表观转录组学新的调控机制，在机体正常生理功能维持中起重要作用，参与调控癌症、糖尿病、心功能和免疫功能改变等年龄相关疾患。

经查询，在衰老诊断领域，有四项专利相关，分别是“指征健康衰老关键通路的血清蛋白质标志物及应用(申请公布号：CN111366736A)”、“健康衰老血清蛋白标志物及应用(申请公布号：CN111337688A)”、“健康衰老诊断circRNA 标志物及应用(申请公布号：CN111424079A)”、“指示健康衰老关键通路的 circRNA小分子标志物及应用(申请公布号：CN111363802A)”。以上发明专利涉及健康衰老的诊断领域，以circRNA和血清标志物为主。

发明内容

本发明的首要目的在于克服现有技术的缺点与不足，提供m⁶A RNA甲基化含量及其甲基化相关酶和结合蛋白在制备衰老检测试剂盒中的应用。

本发明的另一目的在于提供一种衰老检测试剂盒。

本发明的目的通过下述技术方案实现：m⁶A RNA甲基化含量及其甲基化相关酶和结合蛋白在制备衰老检测试剂盒中的应用。

所述衰老包括复制性衰老(即正常衰老过程)和氧化应激诱导的早衰。

所述细胞是随年龄增加而逐渐衰老的细胞；优选为人胚肺成纤维细胞。

所述衰老检测试剂盒是通过检测m⁶A RNA甲基化含量、RNA甲基化相关酶及结合蛋白的蛋白表达量，将其作为标志物判断细胞衰老。

所述RNA甲基化相关酶包括RNA甲基化酶和RNA去甲基化酶。

所述RNA甲基化酶为METTL3、METTL14、WTAP和KIAA1429。