[发明专利]调节环状RNA制备人造血管移植物的方法及其在制造治疗肺动脉高压的生物材料中的应用

说明书

本发明涉及调节环状RNA来制备人造血管移植物的方法，包括：对用来制备人造血管移植物的血管平滑肌细胞VSMCs进行预处理，所述预处理是对VSMCs中的circBMRP2表达量进行增加使VSMCs移动增快。

技术领域

本发明涉及组织工程，尤其涉及一种调节环状RNA来制备人造血管移植物的方法；本发明还涉及这种方法在制造治疗低氧性肺动脉高压的生物材料中的应用。

背景技术

通过组织工程能够提供人造移植物，这种移植物或者用于制备器官或者用于制造血管。将血管平滑肌细胞接种至医学接受的生物降解支架表面融合成膜是组织工程提供人造移植物的关键工序。膜的后续生长也是组织工程提供人造移植物的关键工序。这些关键工序在CN200710039264.8发明专利中均有介绍。这种关键工序所耗费的时间对于组织工程有重要意义，这种重要意义在于减少人造移植物的关键工序所耗费的时间能够缩短人造移植物的生产周期。

发明内容

为了解决减少人造移植物的关键工序所耗费的时间，本发明提供了一种调节环状RNA来制备人造血管移植物的方法，包括：预处理用来制备人造血管移植物的血管平滑肌细胞VSMCs使所述VSMCs的迁移率显著增加，所述VSMCs的迁移率显著性增加是指VSMCs在划痕后经24h培养过程中 VSMCs的迁移率显著性增加，所述预处理VSMCs是显著性增加VSMCs中circBMRP2的表达量，所述显著性增加VSMCs中circBMRP2的表达量是指 VSMCs中circBMRP2的表达量超过置信度为90％的置信区间为[0.96,1.06] 的上限。

所述显著性增加VSMCs中circBMRP2的表达量是通过将VSMCs置于含有circBMRP2的外泌体培养液中实现的。

所述增加VSMCs中的circBMRP2的表达量是通过将VSMCs置于30ml/L O₂、50ml/LCO₂、和920ml/L N₂的混合气氛下培养至少24h实现的来保持所述VSMCs的纯净。

应用circBMRP2作为VSMCs的迁移增速调节剂。

一种VSMCs的迁移增速调节剂，其特征在于，所述VSMCs的迁移增速调节剂包括circBMRP2。

一种调节环状RNA来制备人造血管移植物的方法在制造治疗肺动脉高压的生物材料中的应用,包括：预处理用来制备人造血管移植物的血管平滑肌细胞来显著性降低VSMCs的迁移率，所述预处理VSMCs是显著性降低 VSMCs中circBMRP2的表达量，所述显著性降低VSMCs中circBMRP2的表达量是指使用shRNA慢病毒来调节VSMCs中circBMRP2的表达量显著性 置信度为90％的置信区间为[0.96,1.06]的下限。

一种治疗肺动脉高压的生物材料，其特征在于，所述生物材料包括 VSMCs，所述VSMCs被shRNA慢病转染。

所述治疗肺动脉高压的生物材料制成管状，通过支架将所述治疗肺动脉高压的生物材料定位于肺动脉血管，所述治疗肺动脉高压的生物材料能够将携带的shRNA慢病转染给肺动脉血管。

附图说明

图1是未使用shRNA慢病降低circBMRP2的表达量的VSMCs的阴性对照组NC、使用shRNA慢病降低circBMRP2的表达量的VSMCs的KD组经划痕，且置于常氧条件下培养12h、24h后，用倒置荧光显微镜分别记录的0h、 12h、24h的划痕照片；并且附12h、24h的NC组与KD细胞迁移情况对照统计图。

图2是检测常氧条件和低氧条件培养的VSMCs中circBMRP2的表达量后，给出的常氧组与低氧组circBMRP2的表达量对照统计图。

图3是用倒置荧光显微镜记录常氧组、低氧组划初始划痕面积、培养 12h的划痕面积、培养24h的划痕面积的照片。