[发明专利]一种糖基受体、酶法合成寡糖链的快速分离的方法及应用

权利要求书

1.一种糖基受体，其特征在于：糖基受体为下列结构式中的一种：式Ⅲ所示的二糖化合物、式Ⅳ所示三糖化合物、式Ⅴ所示的四糖化合物、式Ⅵ所示的五糖化合物、式Ⅶ所示的六糖化合物、式Ⅷ所示的三糖化合物、式Ⅸ所示的四糖化合物、式Ⅹ所示的四糖化合物、式Ⅺ所示的三糖化合物、式Ⅻ所示的四糖化合物、式ⅩⅢ所示的五糖化合物；

(Ⅲ)；

(Ⅳ)；

(Ⅴ)；

(Ⅵ)；

(Ⅶ)；

(Ⅷ)；

(Ⅸ)；

(Ⅹ)；

(Ⅺ)；

(Ⅻ)；

(ⅩⅢ)。

2.一种权利要求1所述的糖基受体的制备方法，其特征在于：所述方法为：将糖基体与醋酐反应后，将其全部裸露的羟基用乙酰基保护；然后用醋酸铵将全乙酰化乳糖的异头位的乙酰基进行脱除，在制备成三氯乙酰亚胺酯的糖基供体与2-氯乙氧基乙醇进行β-构型糖苷化反应，然后依次叠氮化，叠氮基的还原，脱保护和γ-硫代丁内酯反应，即可获得。

3.如权利要求2所述的糖基受体的制备方法，其特征在于：具体步骤为：

1）糖基体、醋酐、醋酸钠进行回流反应得到固体化合物13；

2）固体化合物13与醋酸铵、甲醇/四氢呋喃，进行反应，产物浓缩后得到的化合物溶解在二氯甲烷中加入三氯乙腈和DBU反应得到前步化合物，前步化合物与受体2-氯乙氧基乙醇、活化的4Å分子筛混合反应后，加入三氟甲磺酸三甲基硅酯继续反应，得到产物化合物14；

3）化合物14与N,N- 二甲基甲酰胺、叠氮钠和四丁基碘化铵回流反应得到化合物15；

4）化合物15与硼氢化钠、硫酸铜、甲醇反应，将所得化合物与甲醇钠反应，再将所得产物与γ-硫代丁内酯和二硫苏糖醇DTT反应，得到化合物1即糖基受体。

4.如权利要求3所述的糖基受体的制备方法，其特征在于：步骤1）中糖基体、醋酐、醋酸钠的比例为5-7mmol:5-6mL:22-24mmol；步骤1）中反应的温度为150-170℃，反应的时间为5-7h。

5.如权利要求3所述的糖基受体的制备方法，其特征在于：步骤2）中化合物13与醋酸铵、三氯乙腈、DBU、2-氯乙氧基乙醇、活化的4Å分子筛的摩尔比例为1.0: 2-4 :1.5-3:0.01-0.05: 1.2-2.0。

6.如权利要求3所述的糖基受体的制备方法，其特征在于：步骤2）中化合物13与醋酸铵的反应温度为室温，反应时间为7-9h，然后加入三氯乙腈和DBU后在室温下，反应的时间为0.6-1.2h；加入受体2-氯乙氧基乙醇、4Å分子筛后，先在室温下反应15-25min，然后在-25～-35℃下反应5-15min；加入三氟甲磺酸三甲基硅酯后，在-25～-35℃下反应0.8-1.2h。

7.如权利要求3所述的糖基受体的制备方法，其特征在于：步骤3）中化合物14与N,N-二甲基甲酰胺、叠氮钠和四丁基碘化铵的比例为1.0: 1.0:0.3-0.5；步骤3）中反应的温度为70-90℃，反应的时间为10-13h。

8.如权利要求3所述的糖基受体的制备方法，其特征在于：步骤4）中，化合物15、硼氢化钠、硫酸铜、甲醇钠、γ-硫代丁内酯和二硫苏糖醇DTT的比例为1.0 mmol: 1.1-1.5 mmol:0.2-0.5mmol:0.5-1.0 mL 1.1-1.5 mmol:0.2-0.5 mmol；步骤4）中化合物15与硼氢化钠、硫酸铜、甲醇反应的温度为室温，反应的时间为1-3h；所得化合物与甲醇钠室温下反应25-35min，然后所得产物与γ-硫代丁内酯和二硫苏糖醇DTT反应的温度为80-95℃，反应的时间为2-4h。

9.权利要求1所述的糖基受体在寡糖链合成方面的应用。