[发明专利]无血清干细胞培养基及其应用在审
申请号: | 202110096731.0 | 申请日: | 2021-01-25 |
公开(公告)号: | CN112662623A | 公开(公告)日: | 2021-04-16 |
发明(设计)人: | 关方霞;冯娟;崔南征;郭军辉 | 申请(专利权)人: | 中科博生生物工程有限公司 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775 |
代理公司: | 无锡市汇诚永信专利代理事务所(普通合伙) 32260 | 代理人: | 郭鸿宾 |
地址: | 450000 河南省郑州市郑东新区平安大道*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 血清 干细胞 培养基 及其 应用 | ||
1.无血清干细胞培养基,其特征在于,在基础培养中添加12-25mg/mL聚乳酸营养微球、1-10μg/mL谷胱甘肽、1-4mM L-谷氨酰胺、浓度40-60μMβ-巯基乙醇、0.01-1mmol/L维A酸和1-10v/v%非必需氨基酸。
2.根据权利要求1所述的无血清干细胞培养基,其特征在于,所述聚乳酸营养微球的制备方法如下:
将聚乳酸溶于二氯甲烷形成聚乳酸溶液;并将胰岛素、转铁蛋白、BMP-4、FGF-2和细胞生长因子添加进入聚乳酸溶液中形成复合营养液,将所述复合营养液喷雾至60-70℃的水中后进行干燥处理,获得聚乳酸营养微球。
3.根据权利要求2所述的无血清干细胞培养基,其特征在于,胰岛素、转铁蛋白、BMP-4、FGF-2、细胞生长因子和聚乳酸的质量比为(0.1-0.5):(0.01-0.05):(0.01-0.05):(0.01-0.05):(0.3-0.7):1。
4.根据权利要求1所述的无血清干细胞培养基,其特征在于,所述基础培养基为DEME培养基。
5.根据权利要求1所述的无血清干细胞培养基,其特征在于,所述非必须氨基酸由谷氨酸、丙氨酸、甘氨酸、天门冬氨酸、胱氨酸、脯氨酸、丝氨酸和酪氨酸组成。
6.无血清干细胞培养基的应用,其特征在于,将权利要求1-5中任一项所述无血清干细胞培养基用于培养干细胞。
7.根据权利要求6所述的无血清干细胞培养基的应用,其特征在于,所述干细胞的培养的条件为5%CO2、37℃,密度接种为(0.1-10)×10 5个/mL。
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