[发明专利]一种具有促生活性的类芽孢杆菌属细菌及其制备和应用

说明书

本发明涉及一种具有促生活性的类芽孢杆菌属细菌，该菌株为类芽孢杆菌（Paenibacilluspabuli）B03，其保藏编号为CGMCC No.21386。同时，本发明还公开了该菌株的制备方法和应用。本发明从植物根部分离出菌株，并将菌株的代谢物作用于牧草，用于改良草原土壤生物化学肥力状况，提高草原土壤生态系统功能稳定性，恢复和提高草原生产力，增加产量、提高品质从而促进畜牧业的发展。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，尤其涉及一种具有促生活性的类芽孢杆菌属细菌及其制备和应用。

背景技术

植物根际促生细菌(Plant growth-promoting rhizobacteria，PGPR) 是一类定殖于植物的根际、叶际及体内，在生物和非生物胁迫下促进植物的生长、发育和抗逆等过程的细菌。近些年来，基于PGPR在农业、环境保护等领域的重要价值, 已成为国内外学者研究的热点。现已发现假单胞菌（Pseudomonas）、芽胞杆菌（Bacillus）、类芽胞杆菌（Paenibacillus）、土壤杆菌(Agrobacterium)、黄杆菌（Flavobacterium）等20多个种属的根际生物具有防病促生的潜能。

近年来研究表明，由于过量施用化肥而导致草原土壤酸化、营养失衡、生物多样性减少、生产力降低、草地退化等严重威胁到草原生态系统功能。在此背景下，通过接种PGPR可用来改良草原土壤生物化学肥力状况，提高草原土壤生态系统功能稳定性，恢复和提高草原生产力，增加产量、提高品质从而促进畜牧业的发展。因此，微生物菌剂成为新的研究热点，通过选育具有抗病和促生特性的内生菌及根际微生物，用于提高牧草的生长和抗病能力，从而治理退化的草场。

目前，开发利用安全有效的生物源促生剂越来越受到广泛的关注，而微生物的次级代谢产物成为研究和开发新的促生产品的重要来源之一。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种具有促生活性的类芽孢杆菌属细菌。

本发明所要解决的另一个技术问题是提供该类芽孢杆菌属细菌的制备方法。

本发明所要解决的第三个技术问题是提供该类芽孢杆菌属细菌的应用。

为解决上述问题，本发明所述的一种具有促生活性的类芽孢杆菌属细菌，其特征在于：该菌株为类芽孢杆菌（Paenibacilluspabuli）B03。该菌株B03已于2020年12月17日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏中心地址是：北京市朝阳区大屯路，中国科学院微生物研究所，邮编100101，保藏编号为CGMCC No.21386。

如上所述的一种具有促生活性的类芽孢杆菌属细菌的制备方法，其特征在于：选取健康紫花针茅带根植株，将紫花针茅新鲜的根部切成长度为0.2~0.5厘米的小段，经消毒后用灭菌蒸馏水冲洗三次，并置于无菌滤纸上吸干水分；然后放置于NA平板培养基上，28±2℃避光培养；待平板上长出肉眼可见的细菌菌落后，用无菌牙签挑取少许菌落转移至新的NA平板培养基上进行纯化，没有污染，则转入NA斜面培养基划线在4℃下短期保存或转入NA液体培养基和甘油的混合液中在-70℃下保存长期保存即得。

所述消毒是指对切段的紫花针茅新鲜的根部先经体积浓度为75%的乙醇表面消毒30 s，再经质量浓度为3%的次氯酸钠表面消毒5 min。

所述NA平板培养基是指在1000mL水中加入蛋白胨10g、牛肉粉 3g、氯化钠5g、琼脂15g，混合均匀后调pH值至7.2~7.4，经121℃灭菌30min制得。

所述NA液体培养基是指在1000mL水中加入蛋白胨10g、牛肉粉 3g、氯化钠5g，混合均匀后调pH值至7.2~7.4，经121℃灭菌30min制得。