[发明专利]金樱子多糖制备方法、鉴定方法和应用有效
申请号: | 202110052315.0 | 申请日: | 2021-01-15 |
公开(公告)号: | CN112759661B | 公开(公告)日: | 2023-04-25 |
发明(设计)人: | 郭远强;许婧;张娇娇;李颖;宋紫腾;张少杰 | 申请(专利权)人: | 南开大学 |
主分类号: | C08B37/00 | 分类号: | C08B37/00;G01N21/3563;G01N24/08;G01N30/02;G01N30/72;A61K31/715;A61K36/738;A61P37/02;A61P35/00;A61K131/00 |
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地址: | 300071*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 金樱子 多糖 制备 方法 鉴定 应用 | ||
1.一种金樱子多糖RL1-2,其特征在于,所述金樱子多糖RL1-2的结构如下所示:
2.如权利要求1所述的金樱子多糖RL1-2的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
S1水提:将金樱子果实加入水中,加热提取,过滤,得提取液和药渣;所述加热温度为60~100℃;
S2醇沉:将步骤S1所得提取液减压浓缩,得浓缩液1;向浓缩液1中加入乙醇,至乙醇体积浓度为50%,静置,收集沉淀和上清液,得粗多糖RL1和上清液1;S3纯化:
一次纯化:
将步骤S2所得粗多糖RL1进行除蛋白,透析,冻干,得金樱子多糖;
二次纯化:
将一次纯化后的多糖RL1进行DEAE-Sepharose FF柱层析,用0~2M的NaCl进行梯度洗脱,使用苯酚-硫酸法跟踪洗脱曲线,根据洗脱曲线分别收集糖部分,将洗脱峰为0.05M的NaCl洗脱部分浓缩、冷冻干燥;再分别用水进行溶解,离心,取上清液;
将上清液再进行Sephadex G-75柱层析,用水进行洗脱,利用苯酚-硫酸法检测洗脱曲线,根据洗脱曲线收集糖部分,浓缩、冷冻干燥,得RL1-2。
3.如权利要求2所述的金樱子多糖RL1-2的制备方法,其特征在于,所述步骤S1中水的添加量为所述金樱子果实重量的5~15倍,提取时间1~10h。
4.如权利要求2所述的金樱子多糖RL1-2的制备方法,其特征在于,所述步骤S2中减压浓缩温度为40~70℃,静置的时间为10~28h。
5.如权利要求1所述的金樱子多糖RL1-2以及权利要求2-4所述的金樱子多糖RL1-2的制备方法制备得到的金樱子多糖RL1-2在制备增强免疫力药物或抗白血病药物中的应用。
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