[发明专利]登革热NS1抗原、IgG/IgM抗体两联检测试纸条、检测卡及试剂盒

说明书

本发明涉及一种登革热NS1抗原、IgG/IgM抗体两联检测试纸条，试纸条包括登革热NS1抗原试纸条和登革热IgG/IgM抗体试纸条，登革热NS1抗原试纸条包括第一金标垫层和第一硝酸纤维素膜，第一金标垫层固相化有登革热NS1单克隆抗体‑胶体金复合物，第一硝酸纤维素膜包被有四个血清型的登革热NS1单克隆抗体的检测线，登革热IgG/IgM抗体试纸条包括第二金标垫层和第二硝酸纤维素膜，第二金标垫层固相化有四个血清型的登革热重组抗原‑胶体金复合物，第二硝酸纤维素膜包被有鼠抗人IgG单克隆抗体的检测线T1、鼠抗人IgM单克隆抗体的检测线T2；本发明试纸条一次操作即可联合检测IgM/IgG抗体、NS1抗原，简化了操作过程，有效地诊断了机体免疫应答反应状态，达到真正的POCT检测的目的。

技术领域

本发明属于生物检测领域，具体涉及一种利用免疫层析技术检测血清、血浆、全血中登革热病毒IgG/IgM抗体、NS1抗原的两联检测试纸条、检测卡及试剂盒。

背景技术

登革热是由登革热病毒引起，埃及伊蚊或白伊蚊传播的一种急性传染病。登革热病毒为小型黄病毒，属于黄病毒科(Flaviviridae)黄病毒属(Flavivirus)，按流行病学分类属虫媒病毒B组，血清学上分为四个血清型。登革热病毒能够引起一系列的临床症状，临床上以突然高热、广泛出血、全身剧烈肌肉疼痛和关节痛，极度疲乏等为主要症状，多伴有皮疹、淋巴腺肿和白细胞减少等现象。

目前，该病毒广泛流行于全球热带和亚热带的非洲、美洲、东南亚和太平洋地区等多个国家及地区，是分布最广，发病最多，危害较大的一种虫媒病毒性疾病，为全球最严重的由蚊虫传播的病毒性疾病。随着全球气候变暖日趋严重，登革热地理分布上有蔓延的趋势，发病率和疫情的严重程度也有所增加。登革热已成为全球性的严重公共卫生问题。由此可见，尽早发现并尽早对登革热患者采取隔离措施并进行对症治疗，从源头上对登革热病毒的蔓延进行有效遏制，是防止登革热病毒传播的最佳途径和手段。

登革热病毒感染后，潜伏期为3～14天（通常4～7天），潜伏期内机体的免疫系统会产生一系列的免疫应答反应。初次感染后，机体产生抗体的速度较慢，且滴度也较低，IgM为最初应答的抗体，一般在发病的第五天，可检测到80%水平的IgM抗体，IgM抗体水平在发病后2周达高峰，然后逐步下降，可保持2～3个月。IgG一般在发病的第7天后才出现，滴度很低，上升速度也慢，病毒NS1抗原在发病后4～5天内，可在病人的血清、血浆、白细胞、脑脊液和尸检组织标本中分离到，病毒核酸及NS1抗原在这个时期的检出率高，且抗原在血液中存在的时间较长。

血清学检测是国内外公认的临床诊断较为可靠的指标之一，目前，常用的登革热抗原、抗体检测方法有：ELISA法和PCR法、胶体金法。ELISA法和PCR法，这些检测技术需要特殊的仪器设备，并且要求专业技术人员在专业的实验室进行检测，并且操作繁琐、技术难度大、耗时长、实验条件要求高、并存在严重的生物安全问题，不适宜于现场即时检测，适宜作为确证方法，但不能进行大范围初筛，在实际工作中进行推广应用。胶体金法有单独的IgG/IgM抗体、NS1抗原检测试剂，特异性IgM抗体，表明有近期感染的发生，但IgM的检测阴性并不能证明机体未受到感染，还需要检测半衰期较长，含量最高的特异性IgG抗体，以明确诊断。另外，机体感染后，最先出现的是NS1抗原，所以特异性IgM、IgG抗体以及NS1抗原的同时检测，可以有效诊断机体对特定病原体的免疫应答反应状态，登革热病毒潜伏期长，亟待有高灵敏度、高特异性的登革热IgM/IgG抗体、NS1抗原胶体金法联合检测试剂的出现。

发明内容

本发明要解决的技术问题是针对以上不足，提供一种登革热NS1抗原、IgG/IgM抗体两联检测试纸条，试纸条检测灵敏度高、特异性好，这种抗原抗体联合检测试纸条可以在登革热感染早期、初次感染及二次或多次感染登革热的病人进行快速早期诊断及筛查，缩短窗口期，提高检出率。