[发明专利]生物发光工程化细菌组合物及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种生物发光工程化细菌组合物，其特征在于，包括：

a)工程化细菌，所述的工程化细菌表达荧光素酶，宿主为减毒的沙门氏菌、大肠杆菌、李斯特菌中的一种或多种；以及，

b)发光底物，所述的发光底物在荧光素酶催化下可产生激活态氧化荧光素；以及，

c)光敏剂分子，所述的光敏剂分子在激活态氧化荧光素作用下可产生具有细胞毒性的单线态氧分子；以及，

d)生物高分子，所述的生物高分子可原位成胶；

所述的光敏剂分子为二氢卟吩e6、原卟啉中一种或多种；

所述的生物高分子为海藻酸盐。

2.根据权利要求1所述的生物发光工程化细菌组合物，其特征在于，所述的发光底物为D-荧光素、D-荧光素钾盐、D-荧光素钠盐中的一种或多种。

3.一种权利要求1-2任一项所述的生物发光工程化细菌组合物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：分别配制发光底物溶液、光敏剂分子溶液和生物高分子溶液，再将工程化细菌培养后制备工程化细菌溶液，将发光底物溶液、光敏剂分子溶液、生物高分子溶液和工程化细菌溶液混合后得到所述的生物发光工程化细菌组合物。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，工程化细菌溶液的浓度为10⁵ CFU~10⁷CFU。

5.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，发光底物溶液的浓度为5~50mg/mL。

6.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，光敏剂分子溶液的浓度为0.1~5 mg/mL。

7.根据权利要求3所述的方法，其特征在于，生物高分子溶液的浓度为5~50 mg/mL。

8.权利要求1-2任一项所述的生物发光工程化细菌组合物在制备肿瘤免疫治疗佐剂、光动力增强佐剂或细菌治疗增强佐剂中的应用。