[发明专利]一种数字ELISA系统及其使用方法有效
申请号: | 202110012309.2 | 申请日: | 2021-01-06 |
公开(公告)号: | CN112816706B | 公开(公告)日: | 2023-08-29 |
发明(设计)人: | 杜林;周嘉;张大伟;景大雷 | 申请(专利权)人: | 上海理工大学 |
主分类号: | B01L3/00 | 分类号: | B01L3/00;G01N33/68;G01N33/558;G01N21/64 |
代理公司: | 上海德昭知识产权代理有限公司 31204 | 代理人: | 郁旦蓉 |
地址: | 200093 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 数字 elisa 系统 及其 使用方法 | ||
1.一种数字ELISA系统,其特征在于,包括:
自动化加样模块,包括移动平台、设置于所述移动平台上的可拆卸基板、设置于所述可拆卸基板上且表面疏水的基底芯片以及一端接触所述基底芯片上表面并与所述基底芯片之间具有倾斜角和压力的可控制压载板;
集成光检测模块,包括用于提供光源的激发光源、用于将所述光源分解为单色光后得到荧光的单色器、用于测量荧光并用于拍摄所述基底芯片的普通图像和荧光图像的检测器以及用于对所述普通图像和荧光图像进行处理分析以得到数字化信号的光强信号分析器;以及
数字化计算模块,与所述光强信号分析器通信连接,用于对所述数字化信号进行处理,从而得到蛋白定量结果;
其中,所述基底芯片表面设置有由多个微孔组成的微孔阵列以及设置于所述微孔阵列旁并在所述基底芯片边缘处的废液槽,
所述微孔为具有三维形状的微孔,其开口从下往上逐渐变大,且至少一面侧壁为倾斜壁,
全部或部分所述微孔内靠近底部的位置固定有至少一个表面具有蛋白吸附能力的珠,
所述数字化计算模块为数字ELISA计算模型,
所述自动化加样模块还包括放置于移动平台上且竖直方向开设有长孔的基座、通过穿过所述长孔的轴固定的且下方具有开口的固定件以及放置于所述固定件顶部边缘处的并用于调整所述基底芯片与所述可控制压载板之间压力的砝码,
所述可控制压载板的一端铰接于所述固定件的开口处,另一端接触所述基底芯片的上表面,且铰与所述基底芯片平行,
所述可控制压载板的底端且与所述基底芯片接触处设置有用于放置珠悬浮溶液且底部具有用于溶液流出的小孔的三角形器皿。
2.根据权利要求1所述的数字ELISA系统,其特征在于:
其中,所述珠通过在高温环境下部分熔化,从而与所述基底芯片固定,或者所述珠通过外力挤压与所述基底芯片固定。
3.根据权利要求1所述的数字ELISA系统,其特征在于:
其中,所述可拆卸基板通过美纹胶或电磁力固定在所述基底芯片以及所述移动平台上。
4.一种采用如权利要求1所述的数字ELISA系统的使用方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤1,配置珠悬浮溶液,而后将所述珠悬浮溶液滴到所述可控制压载板靠近所述基底芯片的上表面的一端,所述可控制压载板接触所述基底芯片上表面,并且所述移动平台进行移动,当集成光检测模块观测到所述微孔内载有所述珠后,将废液刮至所述废液槽,并停止所述移动平台移动,从而完成样品的加载;
步骤2,对所述基底芯片进行加热使所述珠稳定固定于所述微孔底部位置,得到珠阵列;
步骤3,将需要包被的蛋白溶液滴加载到所述基底芯片上,根据需要选择是否对所述珠的表面进行封闭,得到包被的珠阵列;
步骤4,将待测样品溶液加载到所述基底芯片上,待自动化加载完成后,在合适条件下孵育,目标蛋白将会被吸附到所述珠的表面蛋白上;
步骤5,根据需要重复步骤3,而后加载酶标蛋白溶液,生成免疫复合物结构;
步骤6,将底物溶液加载到所述基底芯片上,利用所述集成光检测模块进行检测,得到数字化信号;
步骤7,将所述数字化信号带入所述数字化计算模块,得到所述待测样品的蛋白定量结果。
5.根据权利要求4所述的数字ELISA系统的使用方法,其特征在于:
其中,所述步骤1中的所述基底芯片与所述移动平台的相对移动为匀速运动、非匀速运动、旋转运动以及直线运动中的一种或多种的组合。
6.根据权利要求4所述的数字ELISA系统的使用方法,其特征在于:
其中,所述步骤6中的底物溶液为四甲基联苯胺。
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