[发明专利]胎盘源性同种异体CAR-T细胞及其用途

说明书

本发明公开了表达嵌合抗原受体(CAR)的T细胞群，其中所述T细胞是来源于脐带血、胎盘灌注液或其混合物的胎盘T细胞。经显示，相对于替代性细胞群，如来源于外周血单核细胞T细胞的细胞群，此类细胞群在多个方面都有所改善。本发明还公开了治疗有需要患者的癌症，如血液癌症，例如B细胞癌症或其症状的方法。这些方法包括向所述患者施用有效缓解所述患者的所述癌症或其症状的量的本发明中任一种的T细胞群。

本申请要求2019年12月4日申请的美国临时专利申请第62/943,760号、2019年12月5日申请的第62/944,349号和2020年6月5日申请的第63/035,432号的优先权，各案的公开内容以整体引用的方式并入本文中。

技术领域

本发明部分地涉及嵌合抗原受体(CAR)细胞和CAR疗法。

背景技术

CAR疗法是作为针对癌症的极其重要的工具而出现。然而，这些疗法典型地依赖于使用患者自身的细胞，例如来源于外周血单核细胞(PBMC)的T细胞作为效应细胞群。由于必须收集每名患者的细胞，进行测试并将其转化成CAR治疗剂，故CAR疗法：1)极其昂贵；并且2)只能在某些愿意和/或能够进行该疗法的中心得到。这些缺点使得许多有需要的群体在很大程度上无法使用CAR疗法。本发明部分地涉及产生旨在缓解这些和其它问题的一种现成的同种异体CAR疗法。

自体CAR-T疗法已成为血液癌症患者的标准护理的一部分。CAR-T疗法中细胞的来源是来自于患者的PMBC。同种异体CAR-T细胞疗法的研发已进入临床试验期，该疗法还使用了PBMC作为源材料。UCB-T细胞具有不同的生物特性，这使其更适合作为同种异体细胞疗法的源材料。相较于从PBMC扩增的T细胞，这些细胞具有突出的Tcm和T幼稚表型(phenotype)，呈现增加的增殖活性，并且保持较长的端粒/较高的端粒酶活性(Okas等人,《免疫疗法杂志(Journal of Immunotherapy)》,2010；Frumento等人,《移植杂志(Journalof Transplantation)》,2013)。它们对HLA错配具有较强的免疫耐受性并具有减弱的同种异体激活作用(Barker等人,《血液(Blood)》,2001；Chen等人,《血液与骨髓移植生物学(Biology of Blood and Marrow Transplantation)》,2006)。出于治疗目的，这些细胞可扩增达到临床规模。

T细胞和NK细胞是同种异体反应性的关键细胞介体。T细胞受体是参与同种异体反应性的关键受体。T细胞受体基因失活使得同种异体反应性降低。宿主NK细胞杀灭含HLA错配的供体细胞或不表达HLA分子。逃避NK细胞杀灭的一个机制是通过表达抑制NK细胞功能的HLA-E分子实现。

已研发出一个独特的平台，该平台使用产后人胎盘源性T细胞用于同种异体平台中以治疗血液癌症和实体癌。在本研究中，已展示利用CD19 CAR-T和CD20 CAR-T细胞疗法胎盘T细胞治疗B细胞恶性病进行的概念验证。尽管胎盘源性T细胞(P-T细胞)展示较强的免疫耐受性和减弱的同种异体反应，但我们设想并且已经展示T细胞受体a恒定区(T-cellreceptor a constant，TRAC)敲除(KO)，例如CRISPR介导的T细胞受体a恒定区(TRAC)敲除(KO)，该步骤是避开由P-T细胞上内源性T细胞受体的表达引起的任何潜在GvHD的额外风险缓解策略。必要时，这些细胞可进一步基因修饰成不表达B2M，并表达嵌合HLA-E分子以降低T/NK细胞的同种异体反应性/清除。

发明内容

本发明涉及使用胎盘源性细胞作为CAR疗法的细胞来源。这些细胞包含从胎盘、胎盘灌注液和脐带血以及其组合分离的细胞。在本发明实例中，使用了来自脐带血和/或来自胎盘灌注液的细胞，并且经显示，这些胎盘源性细胞优于来自其它细胞来源的T细胞，如来自PBMC的细胞。