[发明专利]改进生物分析测定中的电化学发光信号的方法在审

专利信息
申请号: 202080071784.0 申请日: 2020-10-29
公开(公告)号: CN114641554A 公开(公告)日: 2022-06-17
发明(设计)人: 周明 申请(专利权)人: 苏州安赛诊断技术有限公司;联吡啶钌科学公司
主分类号: C09K11/06 分类号: C09K11/06;C07D213/24;C07D221/12;C07D401/12;C07D471/04;G01N21/66;G01N21/76;G01N33/53;G01N33/577;G01N33/58
代理公司: 北京市领专知识产权代理有限公司 11590 代理人: 李静;任永利
地址: 215009 江苏省苏州市高新区*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 改进 生物 分析 测定 中的 电化学 发光 信号 方法
【说明书】:

本发明公开了电化学发光(ECL)标记物分子,被所述ECL标记物分子标记的检测试剂,和在生物分析检测中使用所述ECL标记物分子和被所述ECL标记物分子标记的检测试剂的方法,特别是,涉及使用非局域化的发光基团的电产生化学发光或电化学发光(ECL)的免疫分析和核酸分析。

相关申请的交叉引用

本申请要求获得2019年10月31日提交的美国非临时专利申请第16/670,226号的优先权,该申请的公开内容通过引用全部纳入本文。

技术领域

本发明涉及生物分析测定的改进,特别是采用离域发光基团的电致化学发光或电化学发光(ECL)的免疫分析和核酸分析。

背景技术

基于生物亲和性的生物分析测定,如免疫分析和DNA探测,在很大程度上依赖于标记技术,借助于标记技术,产生信号的单元通过共价键被连接至可与测定程序中的被测物特异性结合的生物分子的某些功能基团上。在一些竞争性的分析方法中,产生信号的单元通过共价键被连接在被测物分子上后,与样本中的被测物竞争其结合伴侣。在临床电化学发光(ECL)免疫分析中作为标记分子的是一种三联吡啶钌(II)的活性酯,如美国专利5,744,367和文献(G.F.Blackburn et al.,Clin.Chem.1991,37/9,1534-1539)中披露的[4-(N-琥珀酰亚胺基-氧羰基丙基)-4′-甲基-2,2′-联吡啶]双-(2,2′-联吡啶)钌(II)二六氟磷酸盐(图1A)。在发光基团三联吡啶钌[Ru(bpy)3]2+经历电化学氧化和一系列与共反应剂三正丙胺(TPA)的下游化学反应后,形成发光激发态[Ru(bpy)3]2+*并发出可检测的光。一个简化了的反应系列显示在反应路径一(见J.K.Leland andM.J.Powell,J.Electrochem.Soc.1990,137,3127-3131)中。

反应路径一

Ru(bpy)32+-e-→Ru(bpy)33+ (1)

N(C3H7)3-e-→N(C3H7)3·+ (2)

N(C3H7)3·+-H+→H6C3·N(C3H7)2 (3)

Ru(bpy)33++H6C3·N(C3H7)2→Ru(bpy)32+*+P (4)

Ru(bpy)32+*→Ru(bpy)32++hυ (5)

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