[发明专利]改进生物分析测定中的电化学发光信号的方法

权利要求书

1.一种检测样品中被测物的方法，其特征在于，包括以下步骤：

a)将所述样品与检测试剂一起孵育以提供结合有被测物的被标记检测试剂，

其中，所述样品中含有所述被测物，

其中，所述检测试剂被一个或多个ECL标记物标记，其中所述ECL标记物含有至少一个式1的片段：

其中，R¹和R²相同或不同，并且各自含有ECL发光基团，

其中，所述ECL发光基团是过渡金属配合物，并且

其中所述结合有被测物的被标记检测试剂被固定在固相上；

b)将所述结合有被测物的检测试剂与未结合被测物的检测试剂和其他未固定化的物质分开，以提供分开的结合有被测物的被标记检测试剂，其中，所述分开的结合有被测物的被标记检测试剂被固定在所述固相上；

c)使所述分开的结合有被测物的被标记检测试剂与缓冲水溶液接触，其中该缓冲水溶液包含至少一种叔胺；

d)电化学触发ECL发光基团和所述叔胺的氧化，从而释放ECL信号；和

e)检测所述ECL信号，从而检测所述被测物。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，其进一步包括通过用一个或多个ECL标记物标记被测物特异性试剂来提供所述检测试剂的初始步骤。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，还包括以下步骤：

f)定量化所述被测物。

4.根据权利要求1～3任一项所述的方法，其特征在于，其中，所述ECL标记物包括钌或铱配合物。

5.根据权利要求1～4任一项所述的方法，其特征在于，其中，R¹和R²相同。

6.根据权利要求1～5任一项所述的方法，其特征在于，其中，所述叔胺是烷基叔胺。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，其中所述烷基叔胺是支链胺。

8.根据权利要求1～5任一项所述的方法，其特征在于，其中所述叔胺是三正丙胺、三丁胺、三乙胺、或N,N-二丁基乙醇胺。

9.根据权利要求2～8任一项所述的方法，其特征在于，其中，所述被测物特异性试剂是所述被测物的单克隆抗体、蛋白质或核酸识别伴侣或其类似物，或是所述被测物的类似物/同源物/衍生物。

10.根据权利要求1～9任一项所述的方法，其特征在于，其中所述叔胺相对于所述ECL标记物的浓度过量至少10倍。

11.一种ECL标记物，其特征在于，其包括至少一个式1的片段：

其中R¹和R²是相同或不同的，并且各自包括ECL发光基团；

其中，ECL发光体是一种过渡金属配合物，最好是钌或铱配合物。

12.被根据权利要求11所述的一种或多种ECL标记物标记的检测试剂，其特征在于，其中所述检测试剂是化学或生化分子。