[发明专利]脉络丛类器官及其产生方法

权利要求书

1.一种脉络丛类器官，其包含：(a)包含紧密上皮屏障的上皮；和/或(b)一个或多个被上皮包围的包囊。

2.根据权利要求1所述的脉络丛类器官，其中所述上皮呈TTR+、MRP1+、Aqp1+和/或ZO1+。

3.根据权利要求2所述的脉络丛类器官，其中所述TTR、Aqp1和/ZO1在所述上皮的顶面上富集。

4.根据权利要求2所述的脉络丛类器官，其中所述MRP1在所述上皮的顶面和基底面上富集。

5.根据任一前述权利要求所述的脉络丛类器官，其中所述上皮包括顶端微绒毛和任选的初级纤毛。

6.根据任一前述权利要求所述的脉络丛类器官，其进一步包含(c)基质细胞。

7.根据任一前述权利要求所述的脉络丛类器官，其是侧脑室脉络丛类器官。

8.根据任一前述权利要求所述的脉络丛类器官，其中所述一个或多个包囊填充有液体，优选地其中，所述液体包含一种或多种选自甲状腺素转运蛋白(TTR)、簇集素(CLU)、载脂蛋白E(APOE)、载脂蛋白A4(APOA4)和基膜聚糖(LUM)的蛋白质。

9.WNT途径激活剂和骨形态发生蛋白(BMP)信号传导途径激活剂用于产生脉络丛类器官的用途，其中所述脉络丛类器官包含(a)包含紧密上皮屏障的上皮；和/或(b)一个或多个被上皮包围的包囊。

10.一种用于产生脉络丛类器官的方法，其包括从干细胞群体产生神经上皮细胞群体，并在WNT途径激活剂和骨形态发生蛋白(BMP)信号传导途径激活剂的存在下培养所述神经上皮细胞群体。

11.根据权利要求10所述的方法，其中在开始培养所述干细胞群体后约8-12天，开始在WNT途径激活剂和BMP信号传导途径激活剂的存在下培养所述神经上皮细胞群体。

12.一种用于产生脉络丛类器官的方法，其包括以下步骤：

(a)通过培养干细胞群体产生胚状体群体；

(b)在适合于神经诱导的条件下培养所述胚状体群体；

(c)将步骤(b)的产物包埋在三维基质中，优选细胞外基质(ECM)；

(d)在WNT途径激活剂和骨形态发生蛋白(BMP)信号传导途径激活剂的存在下培养步骤(c)的产物，优选地其中步骤(d)在步骤(a)开始后约8-12天开始。

13.根据权利要求12所述的方法，其中步骤(d)的培养包括搅拌。

14.根据权利要求9-13中任一项所述的用途或方法，其中所述WNT途径激活剂选自CHIR99021、Wnt1、Wnt2、Wnt3、Wnt3a、Wnt8a、Wnt8b、Wnt10a、Wnt10b、BML-284、6-溴靛玉红-3'-肟(BIO)、WAY-316606、IQ1、QS11、SB-216763、LY2090314、DCA、2-氨基-4-[3,4-(亚甲二氧基)苄基-氨基]-6-(3-甲氧基苯基)嘧啶和锂，优选地其中，所述WNT途径激活剂是CHIR99021。

15.根据权利要求9-14中任一项所述的用途或方法，其中所述BMP信号传导途径激活剂选自Bmp4、Bmp2、Bmp3、Bmp5、Bmp6、Bmp7、Bmp8a、Bmp8b、Bmp10、Bmp11、Bmp15、异甘草素、4'-羟基查尔酮、芹菜素、香叶木素和ventromorphins(例如SJ000291942、SJ000063181和/或SJ00037178)，优选地其中，所述BMP信号传导途径激活剂是Bmp4。