[发明专利]自组装肽纳米颗粒和其用途

说明书

公开了自组装纳米颗粒组合物，所述自组装纳米颗粒组合物包括多个阳离子细胞穿透肽，每个阳离子细胞穿透肽共价连接到疏水性治疗性分子(例如，抗原肽、mRNA、siRNA、DNA等)并且任选地非共价结合到至少一种TLR(Toll样受体)配体。还公开了用于将所述纳米颗粒组合物用于治疗、预防和/或改善哺乳动物疾病的一或多种症状的方法，所述哺乳动物疾病包含但不限于癌症、感染、炎症以及相关疾病和异常病状。

相关申请的交叉引用

本申请要求于2019年1月12日提交的美国临时专利申请62/791,795的优先权，所述美国临时专利申请的内容通过明确的引用以其整体具体地并入本文。

关于联邦政府赞助的研究或开发的声明

不适用。

联合研究协议的缔约方名称

不适用。

技术领域

本公开涉及纳米颗粒，所述纳米颗粒包括：多个阳离子细胞穿透肽(CPP)，每个阳离子细胞穿透肽共价连接到疏水性治疗性肽，例如，抗原肽；以及任选的至少一或多种TLR(Toll样受体)配体，所述TLR配体非共价结合到CPP连接的治疗性肽。CPP连接的治疗性肽的这种两亲性性质能够与带负电荷的核酸(如CpG、poly(I:C)、mRNA、siRNA和DNA)和疏水性MPLA在中性条件(pH＝7.0)下自组装形成纳米颗粒，但在酸性条件(pH5)下被破坏。所得的含有CPP连接的治疗性肽和TLR配体或mRNA的自组装纳米颗粒允许共同递送到抗原呈递细胞(APC)中用于有效呈递以激活T细胞，从而产生对癌症和其它疾病的强效免疫。因此，本公开还提供了用于通过采用CPP-T细胞肽/TLR配体组装的纳米颗粒来治疗和/或预防癌症(包含各种肿瘤或感染性疾病)的方法。

背景技术

1.癌症免疫疗法

癌症是美国和世界范围内的主要死亡原因，构成了重大公共健康问题。癌症免疫疗法一直是一种有前景的治疗癌症的方法(迪洛伦佐(Di Lorenzo)等人,2011；莱斯特休斯(Lesterhuis)等人,2011；罗森伯格(Rosenberg),2011；王(Wang)和王(Wang),2017)。若干基于免疫疗法的检查点阻断药物，如细胞毒性T淋巴细胞相关蛋白4(CTLA-4)单克隆抗体(Ab)、伊匹单抗(ipilimumab)(Yervoy)、程序性细胞死亡(PD)-l Ab、派姆单抗(pembrolizumab)(Keytruda)已被美国食品药品监督管理局(FDA)批准用于治疗许多类型的癌症(巴奇(Bagcchi),2014；霍迪(Hodi),2010；坎托夫(Kantoff)等人,2010；本德(Bender),2017)。此外，使用经T细胞受体(TCR)或嵌合抗原受体(CAR)工程化的T细胞的基于细胞的免疫疗法已在血癌(如白血病和淋巴瘤)中示出有前景的临床应答。

尽管取得了这些快速进展，但大多数癌症患者通常对检查点阻断疗法没有应答。例如，大约20％的肺癌患者对免疫检查点疗法有应答。仅13％-18％的乳腺癌和前列腺癌患者对免疫检查点疗法有应答(南达(Nanda)等人,2016；权(Kwon)等人,2014)。CAR-T细胞免疫治疗技术在血癌中很有效(赛德莱恩(Sadelain)等人,2017；约翰(Johnson)和朱恩(June),2017)，但其在实体癌中效果不佳，这可能是由于肿瘤微环境中的免疫抑制引起的。最近的研究示出免疫检查点阻断疗法的临床有效性依赖于肿瘤组织中肿瘤反应性T细胞的存在，并且与肿瘤浸润性T细胞、PD-L1表达和突变负荷相关(夏尔马(Sharma)等人,2017)。肿瘤组织缺乏肿瘤浸润性抗原特异性T细胞的癌症患者通常未能对免疫检查点疗法产生应答。为了克服这些问题，癌症疫苗可以增加肿瘤特异性T细胞以控制肿瘤。替代策略是过继性地转移肿瘤特异性T细胞，所述肿瘤特异性T细胞来源于癌症患者或者被工程化为在T细胞上表达肿瘤抗原特异性TCR或CAR。