[发明专利]一种转氨酶及使用其进行催化制备的方法

说明书

本发明提供了一种转氨酶及使用其进行催化制备的方法，本申请中的转氨酶具有如SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列。此外，使用本申请中的转氨酶还能催化一种化合物C的制备方法，其包括如下步骤：在pH＝7.5～9.0的缓冲液中，在转氨酶、氨基供体和磷酸吡多醛存在下，将化合物B进行如下所示的转氨化反应得化合物C即可；所述转氨酶具有如SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列；R¹、R²、R³、R⁴和R⁵分别独立地为H、卤素、C₁‑C₃烷基、C₁‑C₃烷氧基或CN。以本申请中的转氨酶催化的制备方法，条件温和、选择性高、原料转化率高、收率高且产物手性纯度高。

技术领域

本发明涉及化学合成领域，特别是涉及一种转氨酶及使用其进行催化制备的方法。

背景技术

S-4-(1-氨基乙基)苯甲酸是拟肽类药物合成的重要单体(BioorganicMedicinalChemistry Letters，2010，20(3)：1225–1228)也是合成4-(1-氨基乙基)环己烷甲酸的常见药物中间体(Chemical and Pharmaceutical Bulletin，1979，27(11)：2735-2742)。

目前，S-4-(1-氨基乙基)苯甲酸的制备主要采用化学方法制备，例如ISODASUMIRO等以4-氰基苯乙酮为原料，在乙酸-盐酸溶液中回流生成4-乙酰基苯甲酸；再将4-乙酰基苯甲酸溶于10％氨-乙醇溶液，进行转氨反应。最后在Raney镍的催化下将4-乙酰基苯甲酸还原成生成4-(1-氨基乙基)苯甲酸(Chemical and Pharmaceutical Bulletin，1979，27(11)：2735-2742)。

上述S-4-(1-氨基乙基)苯甲酸的合成方法主要存在有机溶剂用量大，手型纯度低等缺陷，探索反应条件简单、环保且易于放大的合成路线，是当今研究的重要方向。生物酶是环境友好型催化剂，其反应条件温和，已经成为医药化工中间体或原料药合成的重要手段，尤其在不对称合成中发挥这不可取代的作用(ChemSusChem，2019,12：1-24)。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于现有技术中的转氨化反应收率低和选择性低。为此，本发明提供了一种转氨酶及使用其进行催化制备的方法，以本申请中的转氨酶催化的制备反应，条件温和、选择性高、原料转化率高、收率高且产物手性纯度高。

为解决上述技术问题，本发明提供以下技术方案：

本发明提供了一种化合物C的制备方法，其包括如下步骤：

在pH＝7.5～9.0(例如pH8.0)的缓冲液中，在转氨酶、氨基供体和磷酸吡多醛存在下，将化合物B进行如下所示的转氨化反应得化合物C即可；

所述转氨酶为源自玫瑰杆菌(Ruegeria pomeroyi)转氨酶的突变体，具有如SEQID NO:2或SEQ ID NO:3所示的氨基酸序列；

R¹、R²、R³、R⁴和R⁵分别独立地为H、卤素、C₁-C₃烷基、C₁-C₃烷氧基或CN。

在某一方案中，所述的化合物B里，某些基团的定义可如下所述，其余基团的定义如上任一方案所述：(针对此表述，以下简称在某一方案中)

在卤素中，所述的卤素优选氟、氯、溴或碘，更优选氟或氯。