[发明专利]一种同时靶向CD19和BCMA的双靶点嵌合抗原受体及其应用

权利要求书

1.一种多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸的序列为含依次连接的靶向CD19的嵌合抗原受体的编码序列、连接肽的编码序列和靶向BCMA的嵌合抗原受体的编码序列的多核苷酸序列或其互补序列。

2.根据权利要求1所述的多核苷酸，其特征在于，所述靶向CD19的嵌合抗原受体的编码序列包括抗CD19单链抗体的编码序列；所述抗CD19单链抗体的编码序列为SEQ ID NO.2。

3.根据权利要求1所述的多核苷酸，其特征在于，所述靶向BCMA的嵌合抗原受体的编码序列包括抗BCMA单域抗体的编码序列；所述抗BCMA单域抗体的编码序列选自SEQ ID NO.9～12。

4.根据权利要求1所述的多核苷酸，其特征在于，所述连接肽为T2A自切割肽；所述T2A自切割肽的编码序列为SEQ ID NO.7。

5.根据权利要求1所述的多核苷酸，其特征在于，所述靶向CD19的嵌合抗原受体的编码序列包含依次连接的CD8信号肽的编码序列、抗CD19单链抗体的编码序列、CD8铰链区的编码序列、CD8跨膜区的编码序列、41BB胞内区的编码序列和CD3ζ胞内区的编码序列。

6.根据权利要求5所述的多核苷酸，其特征在于，所述CD8信号肽的编码序列为SEQ IDNO.1；所述抗CD19单链抗体的编码序列为SEQ ID NO.2；所述CD8铰链区的编码序列为SEQID NO.3；所述CD8跨膜区的编码序列为SEQ ID NO.4；所述41BB胞内区的编码序列为SEQ IDNO.5；所述CD3ζ胞内区的编码序列为SEQ ID NO.6。

7.根据权利要求1所述的多核苷酸，其特征在于，所述靶向BCMA的嵌合抗原受体的编码序列含依次连接的GMCSFR信号肽的编码序列、抗BCMA单域抗体的编码序列、CD28铰链区的编码序列、CD28跨膜区的编码序列、CD28胞内区的编码序列和CD3ζ胞内区的编码序列。

8.根据权利要求7所述的多核苷酸，其特征在于，所述GMCSFR信号肽的编码序列为SEQID NO.8；所述抗BCMA单域抗体的编码序列选自SEQ ID NO.9～12；所述CD28铰链区的编码序列为SEQ ID NO.13；所述CD28跨膜区的编码序列为SEQ ID NO.14；所述CD28胞内区的编码序列为SEQ ID NO.15；所述CD3ζ胞内区的编码序列为SEQ ID NO.6。

9.如权利要求1-8任一项所述的多核苷酸编码的同时靶向CD19和BCMA的双靶点嵌合抗原受体，其特征在于，所述双靶点嵌合抗原受体选自：

(1)含有依次连接的CD8信号肽、抗CD19单链抗体、CD8铰链区、CD8跨膜区、41BB胞内区、CD3ζ胞内区、T2A自切割肽、GMCSFR信号肽、抗BCMA单域抗体、CD28铰链区、CD28跨膜区、CD28胞内区、CD3ζ胞内区的融合蛋白；和

(2)在(1)限定的融合蛋白的氨基酸序列经过取代、缺失或添加一个或多个氨基酸且保留活化T细胞活性的由(1)衍生的融合蛋白。

10.根据权利要求9所述的双靶点嵌合抗原受体，其特征在于，所述CD8信号肽的氨基酸序列为SEQ ID NO.16；所述抗CD19单链抗体的轻链可变区的氨基酸序列为SEQ ID NO.17；所述CD8铰链区的氨基酸序列为SEQ ID NO.18；所述CD8跨膜区的氨基酸序列为SEQ IDNO.19；所述41BB胞内区的氨基酸序列为SEQ ID NO.20；所述CD3ζ胞内区的氨基酸序列为SEQ ID NO.21；所述T2A自切割肽的氨基酸序列为SEQ ID NO.22；所述GMCSFR信号肽的氨基酸序列为SEQ ID NO.23；所述抗BCMA单域抗体的氨基酸序列选自SEQ ID NO.24～27；所述CD28铰链区的氨基酸序列为SEQ ID NO.28；所述CD28跨膜区的氨基酸序列为SEQ IDNO.29；所述CD28胞内区的氨基酸序列为SEQ ID NO.30。