[发明专利]一种甜菜碱磁微粒化学发光检测试剂盒及其制备方法

说明书

本发明提供一种甜菜碱磁微粒化学发光检测试剂盒，包括：第一试剂、第二试剂、第三试剂和第四试剂；其中第一试剂为甜菜碱衍生物‑碱性磷酸酶连接物、第二试剂为甜菜碱抗体‑磁微粒子工作液、第三试剂为清洗缓冲液、第四试剂为酶促发光底物液。本试剂盒用于化学发光免疫分析技术全自动检测人体中甜菜碱的含量。

技术领域

本发明涉及磁微粒化学发光检测试剂盒技术领域，具体涉及一种甜菜碱磁微粒化学发光检测试剂盒及其制备方法。

背景技术

甜菜碱一种具有重要生理功能的物质，其分子量为117D。其主要生理功能有：1、参与同型半胱氨酸的代谢，在甜菜碱-同型半胱氨酸甲基转移酶的作用下甲基从甜菜碱转移到同型半胱氨酸上，分别产生二甲基甘氨酸和甲硫氨酸，从而降低了体内同型半胱氨酸的含量。2、体内甲基的高效供体，甜菜碱含有三个甲基，可代替甲硫氨酸为机体提供甲基；此外甜菜碱在将甲基转移给同型半胱氨酸的同时会生甲硫氨酸，从而降低人体对甲硫氨酸的需求量。3、调节脂肪的代谢，甜菜碱通过促进体内磷脂的合成，一方面降低肝脏中脂肪合成酶的活性；另一方面促进肝脏中载脂蛋白的合成，从而加速了肝脏中脂肪的迁移,降低了肝脏中甘油三醋的含量，减少脂肪肝发生的机率。4、调节细胞内外渗透压、减少应激反应。在机体内渗透压发生激变时，甜菜碱可作为细胞的渗透保护剂，起到缓冲的作用。当机体内的组织渗透压发生变化时，甜菜碱可被细胞吸收，从而调节细胞内外渗透压，减少盐类进入细胞以及细胞内水分的流失。

鉴于甜菜碱在同型半胱氨酸的代谢中重要作用，可单独或联合叶酸和B族维生素B2、B6、B12作为高同型半胱氨酸血症的治疗，有助于降低卒中等心脑血管病的的风险。联合亚甲基四氢叶酸还原酶677C-T多态性及叶酸和B2、B6、B12的检测可作为血同型半胱氨酸含量变化的一个强有力的预测因子。通过甜菜碱-同型半胱氨酸甲基转移酶途径降低同型半胱氨酸含量并刺激蛋氨酸合成，进而增加了S-腺苷甲硫氨酸/S-腺苷同型半胱氨酸的比率，并进一步推动磷脂酰乙醇胺N-甲基转移酶的活化，催化磷脂酰胆碱转变为胆碱，通过胆碱的作用促进体内脂肪的代谢，降低脂肪肝的发生的机率。

现有针对甜菜碱的检测方法主要为实验室分析化学类检测手段，如紫外分光光度法、液相色谱、质谱等方法。但现有的甜菜碱检测方法都有一定的局限性，如检测实验步骤较为复杂、不同检测机构的实验操作标准不一、耗时长、需要配备专用仪器、检测成本较高、不能实现全自动高通量分析等，都不适合大批量临床样品的测定。目前市场上缺乏稳定性好、灵敏度高、特异性强的甜菜碱检测试剂，尤其是质量好的全自动化检验试剂。

甜菜碱在人体内的一碳代谢、甲基转运、同型半胱氨酸的代谢及脂质代谢等方面均具有重要的生理学意义，同时也在心血管疾病的预防监控和治疗方面存在着巨大的潜力。为了克服现有检测技术中存在的固有缺陷，建立一种精准、快速、成本低廉且能实现大批量检测甜菜碱的方法学是非常有必要的。近年来基于标记免疫分析技术建立起来的化学发光检测方法在医学检验领域和临床诊断方面发挥了重要作用。因此，采用化学发光免疫分析技术开发一种全自动检测甜菜碱检测试剂是切实可行的。

发明内容

为解决上述问题，本申请提供一种甜菜碱磁微粒化学发光检测试剂盒，用于化学发光免疫分析技术全自动检测人体中甜菜碱的含量。

为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

本发明提供一种甜菜碱磁微粒化学发光检测试剂盒，包括：第一试剂、第二试剂、第三试剂和第四试剂；

所述第一试剂为甜菜碱衍生物-碱性磷酸酶连接物，所述第二试剂为甜菜碱抗体-磁微粒子工作液，所述第三试剂为清洗缓冲液，所述第四试剂为酶促发光底物液。

本发明还提供一种甜菜碱磁微粒化学发光检测试剂盒的制备方法，其特征在于，包括：

通过混合酸酐法制备所述的第一试剂，所述第一试剂为甜菜碱衍生物-碱性磷酸酶连接物；

通过甜菜碱抗体包被磁微粒子制备所述第二试剂，所述第二试剂为甜菜碱抗体-磁微粒子工作液；