[发明专利]一种猪圆环病毒2型Cap蛋白病毒样粒子保存液及应用

说明书

本发明所述猪圆环病毒2型Cap蛋白病毒样粒子保存液，基于盐离子缓冲液体系，并添加糖类、非离子表面活性剂、金属离子螯合剂、醇类、蛋白质类稳定剂、氨基酸类以及防腐剂，可有效延长猪圆环病毒2型Cap蛋白的保存期，在2‑8℃可以保存12个月，蛋白浓度和活性保持不变，于‑20℃以下保存36个月保持蛋白浓度和活性不变，可用于检测猪圆环病毒抗原浓度试剂盒的标准蛋白的保存液，或者猪圆环病毒2型Cap蛋白亚单位疫苗的稀释溶液。

技术领域

本发明属于体外诊断试剂技术领域，具体涉及一种猪圆环病毒2型Cap蛋白病毒样粒子保存液配方，并进一步公开其应用。

背景技术

猪圆环病毒（Porcinecircovirus，PCV）是迄今发现的最小的动物病毒之一，现已知PCV有两个血清型，即PCV1和PCV2，PCV1为非致病性的病毒，PCV2为致病性的病毒。其中，猪对PCV2具有较强的易感性，感染猪可自鼻液、粪便等废物中排出病毒，经口腔、呼吸道途径感染不同年龄的猪。PCV2是断奶仔猪多系统衰竭综合征、皮炎与肾病综合征等相关疾病的首要致病因子，给养猪业造成巨大的经济损失。据报道，猪圆环病毒2型（PCV2）在世界范围内广泛分布，血清学和病原学调查己证实全世界范围内许多国家和地区的猪群均存在PCV2感染，几乎100%的商品化养猪场感染过PCV2，严重影响世界养猪业的发展。

我国在2000年首次报道了猪圆环病毒病，至今PCV2已在我国猪群中流行二十年。PCV2通常与其他多种病原混合感染，引发猪群发生严重的死亡率，较严重的地区暴病时死淘率高达40%。大量的流行病学研究表明，我国猪群中PCV2感染十分普遍，PCV2抗体阳性率高达80%以上，被调查的猪场阳性率高达100%。在2001-2012年期间，中国分离了258株PCV2株，其中有242株序列均为PCV2b基因亚型，约占比93.8%，证明我国近几年流行的毒株为PCV2b 亚型。近年来研究发现，猪圆环病毒2型ORF2基因Cap蛋白可以在细胞内自主组装成病毒样颗粒（VLPs），这种病毒样颗粒不含病毒核酸但与天然病毒样粒子结构相似，且能有效继发细胞免疫和体液免疫。猪圆环病毒2型Cap蛋白作为一种蛋白质，具有蛋白质惯有的不稳定性、易降解失活等特性，并需要低温保存，因此，寻找开发一种能够稳定保存猪圆环病毒2型Cap蛋白的保存液，对于保证猪圆病毒Cap蛋白的天然活性和浓度稳定具有重要意义，也为特异稳定的检测猪圆环病毒抗原的试剂盒开发以及猪圆环病毒Cap蛋白制备的亚单位疫苗的稳定保存提供保障。

发明内容

为此，本发明所要解决的技术问题在于提供一种猪圆环病毒2型Cap蛋白病毒样粒子保存液配方，以解决现有技术中Cap 蛋白的的保存液稳定性差，而导致的保存困难的问题；

本发明所要解决的第二个技术问题在于提供一种用于检测猪圆环病毒2型Cap蛋白的校准品和质控品的保存液；

本发明所要解决的第三个技术问题在于提供一种猪圆环亚单位疫苗的效力性。

为了解决上述技术问题，本发明所述一种猪圆环病毒2型Cap蛋白病毒样粒子保存液，包括盐离子缓冲液，以及如下浓度的组分：

糖类1-5wt%；

非离子表面活性剂0.1-0.5wt%；

金属离子螯合剂1-5mM；

醇类1-10wt%；

蛋白质稳定剂0.1-1.5wt%；

氨基酸0.5-1.5wt%；

防腐剂0.001-0.05wt%。

具体的，所述盐离子缓冲液的浓度为20-150mM。

具体的，所述盐离子缓冲液包括磷酸盐缓冲液或Tris-HCI缓冲溶液中的至少一种。

具体的，所述的猪圆环病毒2型Cap蛋白病毒样粒子保存液：