[发明专利]一种化学修饰脂肪酶的制备方法、脂肪酶及合成L-丙交酯的应用有效
申请号: | 202011508304.0 | 申请日: | 2020-12-18 |
公开(公告)号: | CN112695020B | 公开(公告)日: | 2023-01-31 |
发明(设计)人: | 李荣杰;徐斌;汪本助;王舒 | 申请(专利权)人: | 安徽丰原生物技术股份有限公司 |
主分类号: | C12N9/20 | 分类号: | C12N9/20;C07K1/107;C12P17/06 |
代理公司: | 北京睿阳联合知识产权代理有限公司 11758 | 代理人: | 杨金贤;张颖 |
地址: | 233700 安徽省蚌埠*** | 国省代码: | 安徽;34 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 化学 修饰 脂肪酶 制备 方法 合成 丙交酯 应用 | ||
1.一种化学修饰脂肪酶的制备方法,其特征在于,所述化学修饰脂肪酶通过将南极假丝酵母脂肪酶B用含有环氧油酸异丙酯的溶剂处理制得;
所述制备方法包括步骤:将南极假丝酵母脂肪酶B加入缓冲液,之后与含环氧油酸异丙酯的溶剂混合;所述溶剂为石油醚,所述缓冲液为磷酸钠缓冲液;
将南极假丝酵母脂肪酶B用含有环氧油酸异丙酯的溶剂处理之后,还包括用固相化载体吸附处理的步骤,所述固相化载体为大孔树脂。
2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述含环氧油酸异丙酯的溶剂中环氧油酸异丙酯的浓度为体积百分比0.1~0.5%。
3.根据权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述含环氧油酸异丙酯的溶剂中环氧油酸异丙酯的浓度为体积百分比0.1~0.3%。
4.根据权利要求1~3任一项所述的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括以下步骤:
(1)将南极假丝酵母脂肪酶B加入磷酸钠缓冲液,之后与环氧油酸异丙酯的石油醚溶液混合均匀;
(2)向步骤(1)得到的混合体系中加入固相化载体大孔树脂,振荡吸附后分离出固体和上清液,所述固体清洗后再真空干燥,得到化学修饰固定化脂肪酶产品。
5.一种化学修饰脂肪酶,其特征在于,所述化学修饰的脂肪酶为环氧油酸异丙酯修饰的南极假丝酵母脂肪酶B酶。
6.根据权利要求5所述的化学修饰脂肪酶,其特征在于,所述化学修饰的脂肪酶为化学修饰固定化脂肪酶。
7.一种采用权利要求1~4中任一项所述的制备方法制得的脂肪酶。
8.权利要求5-7中任一项所述的化学修饰脂肪酶在催化合成丙交酯中的应用。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,所述的化学修饰脂肪酶在催化合成L-丙交酯中的应用。
10.一种丙交酯的合成方法,其特征在于,采用权利要求5-7任一项所述的化学修饰脂肪酶催化合成制得。
11.根据权利要求10所述的合成方法,其特征在于,所述丙交酯以乳酸为原料酶催化制得。
12.根据权利要求11所述的合成方法,其特征在于,所述丙交酯以L-乳酸为原料酶催化制得。
13.根据权利要求10所述的合成方法,其特征在于,包括以下步骤:
将化学修饰的脂肪酶与L-乳酸、分子筛、溶剂混合反应;
之后过滤,收集反应液,浓缩除去溶剂;
浓缩得到的液体在真空条件下蒸馏,收集130±5℃温度的馏分,然后冷却结晶,得到L-丙交酯。
14.根据权利要求13所述的合成方法,其特征在于,所述化学修饰脂肪酶与L-乳酸的质量比为1:(15~25);所述分子筛为5A分子筛;所述溶剂为石油醚;反应温度为20~35℃。
15.根据权利要求14所述的合成方法,其特征在于,所述化学修饰脂肪酶与L-乳酸的质量比为1:(15~20)。
16.根据权利要求15所述的合成方法,其特征在于,所述化学修饰脂肪酶与L-乳酸的质量比为1:18。
17.根据权利要求14所述的合成方法,其特征在于,所述反应温度为20~30℃。
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