[发明专利]一种大规模生产重组Exendin-4多肽的发酵方法

权利要求书

1.一种大规模生产重组Exendin-4多肽的发酵方法，采用pET32a(+)-Exendin-4/BL21(DE3)发酵培养，其特征在于，在发酵中，以乳糖作为发酵培养的诱导剂；

发酵使用的发酵培养基为TB培养基，所述TB培养基含有8mL/L甘油；

菌体OD₆₀₀值为8～12时，加入诱导剂，加入乳糖的终浓度为5g/L，将开始诱导时记为第0小时，于第0、1、2、3、4小时各加1/5体积诱导剂。

2.根据权利要求1所述的生产重组Exendin-4多肽的发酵方法，其特征在于，所述的诱导的条件为，诱导温度为25℃-40℃，诱导时间为4-6小时。

3.根据权利要求2所述的生产重组Exendin-4多肽的发酵方法，其特征在于，所述的诱导温度为25℃-30℃或30℃-40℃。

4.根据权利要求2所述的生产重组Exendin-4多肽的发酵方法，其特征在于，所述的诱导时间为6小时。

5.根据权利要求1所述的生产重组Exendin-4多肽的发酵方法，其特征在于，发酵过程还包括加入补料培养基的步骤。

6.根据权利要求5所述的生产重组Exendin-4多肽的发酵方法，其特征在于，在开始诱导时加入补料培养基。

7.根据权利要求1所述的生产重组Exendin-4多肽的发酵方法，其特征在于，发酵培养基的体积为50L-500L。

8.根据权利要求7所述的生产重组Exendin-4多肽的发酵方法，其特征在于，发酵培养基的体积为200L。

9.根据权利要求1-8任一所述的生产重组Exendin-4多肽的发酵方法，其特征在于，发酵之前还包括：1)一级种子制备和2)二级种子制备的步骤。

10.根据权利要求5所述的生产重组Exendin-4多肽的发酵方法，其特征在于，补料培养基由MgSO₄·7H₂O、胰蛋白胨、酵母提取物和甘油组成，MgSO₄·7H₂O的浓度为11-12g/Lg/L，胰蛋白胨的浓度为98g/L-102g/L、酵母提取物的浓度为98g/L-102g/L，甘油的体积百分数为20％。