[发明专利]一种眼部干细胞膜片及其制备方法有效
申请号: | 202011504302.4 | 申请日: | 2020-12-18 |
公开(公告)号: | CN112604031B | 公开(公告)日: | 2022-08-19 |
发明(设计)人: | 徐哲;曾皓宇;刘园月;刘素娜;刘又瑜 | 申请(专利权)人: | 广东普罗凯融生物医药科技有限公司 |
主分类号: | C12N5/0775 | 分类号: | C12N5/0775;A61L27/38;A61L27/18;A61L27/50;A61L27/54 |
代理公司: | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人: | 肖宇扬 |
地址: | 510700 广东省广州市黄埔区光谱中路1*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 眼部 干细胞 膜片 及其 制备 方法 | ||
1.一种眼部干细胞膜片的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)用完全培养基培养和扩增脐带干细胞;
2)在培养皿中加入明胶溶液,将呈碗状的硅水凝胶载体扣在培养皿中,放入30~40℃培养箱中孵育0.5~2h;
3)另取新的培养皿,加入完全培养基,将步骤2)孵育后的硅水凝胶载体取出,碗口朝上垂直放入完全培养基中;
4)将步骤1)培养的脐带干细胞消化,重悬均匀,吸取细胞悬液滴入呈碗状的硅水凝胶载体的凹面处,待细胞沉底后放入培养箱培养;
5)定期清洗和换液,待脐带干细胞铺满所述硅水凝胶载体后,清洗,将硅水凝胶载体转移到加有完全培养基的膜片取用盒,封上封口膜;
所述呈碗状的硅水凝胶载体是由硅氧烷单体、亲水性单体、交联剂、亲水性添加剂混合聚合成;
所述亲水性单体为甲基丙烯酸酯,所述交联剂为乙二醇二甲基丙烯酸酯,所述亲水性添加剂为乙烯基吡咯烷酮;
所述呈碗状的硅水凝胶载体的直径为12~15mm,曲率半径为8.3~8.6mm,中心厚度为0.07~0.09mm,透氧率为135DK/t以上。
2.如权利要求1所述的眼部干细胞膜片的制备方法,其特征在于,重悬均匀后的细胞悬液的浓度为5~10×105个/mL。
3.一种由权利要求1或2所述的方法制备得到的眼部干细胞膜片,其特征在于,包括呈碗状的硅水凝胶载体和贴附生长在所述硅水凝胶载体的脐带干细胞。
4.如权利要求3所述的眼部干细胞膜片,其特征在于,所述呈碗状的硅水凝胶载体中间设置了一个孔洞,孔洞的直径为2~6mm。
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