[发明专利]基于CRISPR/Cas9基因编辑方法的一种培育自交亲和甘蓝的方法及其应用

权利要求书

1.一种培育自交亲和甘蓝的方法，其特征在于：包括敲除目的甘蓝中SRK15基因，得到自交亲和力高于所述目的甘蓝的自交亲和甘蓝。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述敲除目的甘蓝中SRK15基因通过CRISPR/Cas9基因编辑方法实现。

3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于：所述CRISPR/Cas9基因编辑方法以SRK15基因中符合5’-N₂₀-NGG-3’或5’-CCN-N₂₀-3’序列排列规则的片段为靶序列；N表示A、G、C和T中的任一种，N₂₀表示20个连续的脱氧核糖核苷酸。

4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：所述CRISPR/Cas9基因编辑方法，其靶序列为序列表序列1的第234-252位。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于：所述CRISPR/Cas9基因编辑方法，其sgRNA的序列是核苷酸序列为序列表序列2的单链RNA。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于：所述CRISPR/Cas9基因编辑方法中sgRNA通过向所述目的甘蓝中导入表达所述sgRNA的载体导入所述目的甘蓝中。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于：所述表达所述sgRNA的载体所用的引物的序列如序列表序列4所示的序列和如序列表序列5所示的序列。

8.权利要求1-7任一所述的方法在甘蓝育种中的应用。

9.权利要求6中所述表达所述sgRNA的载体。

10.权利要求6中所述表达所述sgRNA的载体在甘蓝育种中的应用，或在培育自交亲和甘蓝中的应用，或在编辑SRK15基因中的应用。