[发明专利]用于检测阴道微生物的装置及方法

说明书

本发明公开用于检测阴道微生物的装置及方法。该装置包括基片和配套试剂，基片上设置加样孔、排出孔和多个液相小室，液相小室内壁分别固定针对多种不同阴道微生物的捕获探针。配套试剂包括第一缓冲液、清洗液、第二缓冲液和针对不同微生物的引物组。本发明的方法具备同时检测多种阴道微生物菌群的优势，检测方法灵敏度高，菌株之间无交叉反应，特异性好，在阴道微生物检测及临床应用中均有良好的应用前景。

技术领域

本发明涉及微生物的检测，具体地涉及用于检测阴道微生物的装置及方法。

背景技术

1998年Burns等提出微流控技术的“芯片实验室”(lab on a chip,LOC)的概念，即把生物、化学、医学等领域分析样品的过程，包括制备、反应、分离、检测等基本单元集成到一块微米尺度的芯片上，自动完成分析全过程的检测。由于芯片尺寸、形式，反应孔位置等各不相同，一般均需要配备专用微阵列芯片检测仪器。目前，微流控技术属于检验技术发展的前沿方向之一，在临床POCT检测、精准医疗的等方向具有良好前景，主要在临床检测领域的核酸检测、免疫测定、耐药性检测，以及部分公共安全快速检测领域获得应用。国内微流控技术应用比较成熟方向包括微流控核酸检测和微流控免疫检测，其中微流控核酸检测产品主要集中在遗传性疾病，传染性疾病以及精准医疗检测等方向。微流控免疫检测主要产品集中在炎症标志物，心脑血管疾病标志物等方向。

阴道炎是由致病性病原体引起，常见的阴道炎有细菌性阴道炎、病毒性阴道炎、真菌性阴道炎和非特异性阴道炎，分别由淋病奈瑟菌、阴道加德纳菌、肠球菌、生殖道支原体、沙眼衣原体、疱疹病毒、人类细小病毒、白色念珠菌、梅毒螺旋体等感染所致。根据检验结果，判断感染性质，由金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、肠球菌、厌氧菌等所致阴道炎属非传染性；由梅毒螺旋体、淋病奈瑟菌、疱疹病毒、人乳头瘤病毒、解脲脲原体、沙眼衣原体、念珠菌、滴虫等引起的属性传播性疾病，有一定的传染性。阴道分泌物微生物学检查可检出阴道炎等疾病的病原菌，结合阴道分泌物的物理学及清洁度检查等可进行明确的病因诊断，并为临床治疗及其同其他非感染性疾病提供鉴别诊断依据。微生物培养后和进行药敏试验，选择敏感药物进行治疗，可提高治疗效果。

发明内容

为解决现有技术中的至少部分技术问题，本发明提供一种用于检测阴道微生物的装置及方法，该装置采用可检测阴道微生物的捕获探针、引物组合以及特定的检测缓冲液，通过检测装置的多个液相小室从而实现多种阴道微生物检测，具体如下。

本发明的第一方面，提供一种用于检测阴道微生物的装置，其至少包括基片和配套试剂，其中：

所述基片上设置加样孔、排出孔和多个液相小室，所述多个液相小室设置为使样本或试剂能够通过流入通路进入各个液相小室，并能够通过流出通路流出各个液相小室，各液相小室的内壁分别固定针对多种不同微生物的捕获探针；

所述配套试剂包括第一缓冲液、清洗液、第二缓冲液和针对不同微生物的引物组，其中针对同一微生物的捕获探针与其对应的引物组具有不同的结合区，且捕获探针的Tm值低于引物组中各引物的Tm值；

所述多种微生物包括淋病奈瑟菌、阴道加德纳菌、肠球菌、生殖道支原体、沙眼衣原体、疱疹病毒、人类细小病毒、白色念珠菌。

根据本发明所述的用于检测阴道微生物的装置，优选地，所述多个液相小室通过通路分别与同一加样孔连通，从而能够通过一次加样使样本进入各个液相小室。

根据本发明所述的用于检测阴道微生物的装置，优选地，所述第一缓冲液包含柠檬酸钠缓冲液、0.2-0.8M甜菜碱、1.5-2.5M四甲基氯化铵、4-6％重量/体积比的硫酸葡聚糖和10-30体积％的甲酰胺。

根据本发明所述的用于检测阴道微生物的装置，优选地，所述清洗液包含3MNaCl、10mM Tris-HCl pH 7.5、1mM EDTA和0.1％Tween-20。