[发明专利]用于检测阴道微生物的装置及方法

权利要求书

1.一种用于通过一次性加样同时检测多种阴道微生物的微流控装置，其特征在于，包括基片和配套试剂，其中：

所述基片包括微流路系统、负压排气系统和在所述基片上设置加样孔、排出孔和多个液相小室，所述微流路系统包括流入通路和流出通路，所述负压排气系统设置为控制微管道内微量液体流动，直至充满整个液相小室，所述多个液相小室设置为使样本或试剂能够通过所述流入通路进入各个液相小室，并能够通过所述流出通路流出各个液相小室，每个液相小室采用菱多边形，底部采用锥形结构，从而有利于恒温扩增的温度均衡控制和防止因液体渗漏导致检测污染，各液相小室的内壁分别固定针对多种不同微生物的捕获探针；

所述配套试剂包括第一缓冲液、清洗液、第二缓冲液和针对不同微生物的引物组，其中针对同一微生物的捕获探针与其对应的引物组具有不同的结合区，且捕获探针的Tm值低于引物组中各引物的Tm值，所述捕获探针的序列如SEQ ID NO:1-8所示，所述引物组中引物的序列如SEQID NO:9-40所示；

所述第一缓冲液包含柠檬酸钠缓冲液、0.2-0.8 M甜菜碱、1.5-2.5M四甲基氯化铵、4-6%重量/体积比的硫酸葡聚糖和10-30体积%的甲酰胺，所述第二缓冲液包含Tris-HCl、KCl、(NH₄)₂SO₄、MgSO₄、Tween-20、Trion X-100和dNTPs；

所述多种微生物包括淋病奈瑟菌、阴道加德纳菌、肠球菌、生殖道支原体、沙眼衣原体、疱疹病毒、人类细小病毒和白色念珠菌。

2.根据权利要求1所述的微流控装置，其特征在于，所述多个液相小室通过通路分别与同一加样孔连通，从而能够通过一次加样使样本进入各个液相小室。

3.根据权利要求1所述的微流控装置，其特征在于，所述配套试剂进一步包括dNTPs和聚合酶。

4. 根据权利要求1所述的微流控装置，其特征在于，所述清洗液包含3 M NaCl、10mMTris-HCl pH 7.5、1 mM EDTA和0.1% Tween-20。

5.根据权利要求1所述的微流控装置，其特征在于，所述第二缓冲液进一步包含Bst聚合酶。

6.根据权利要求1所述的微流控装置，其特征在于，所述引物组包含外引物对、内引物对和环引物。