[发明专利]一种用于制备水凝胶的胶原蛋白及其制备方法有效
| 申请号： | 202011491036.6 | 申请日： | 2020-12-17 |
| 公开（公告）号： | CN112521491B | 公开（公告）日： | 2022-06-10 |
| 发明（设计）人： | 王玠;许菲;曹俊 | 申请（专利权）人： | 江南大学;江苏省血吸虫病防治研究所 |
| 主分类号： | C07K14/78 | 分类号： | C07K14/78;C12N15/70;C12N5/00;A61K47/42;A61L27/24;A61L27/52 |
| 代理公司： | 北京睿博行远知识产权代理有限公司 11297 | 代理人： | 张燕平 |
| 地址： | 214000 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 制备 凝胶 胶原 蛋白 及其 方法 | ||
1.一种采用胶原蛋白S-VCL-S制备水凝胶的方法，其特征在于：以质量浓度为3%-4%胶原蛋白S-VCL-S为原料，质量浓度为0.05%-0.1%的双氧水为交联剂进行交联，使原料分子间通过二硫键交联形成水凝胶，所述胶原蛋白S-VCL-S核苷酸序列为SEQ ID No.1所示。
2.如权利要求1所述采用胶原蛋白S-VCL-S制备水凝胶的方法，其特征在于：所述胶原蛋白S-VCL-S的制备方法为：将带有目标胶原蛋白基因的pET-28a质粒转化大肠杆菌BL21（DE3），挑取单克隆进行摇瓶发酵生产，收集菌体，得到重组蛋白；将重组蛋白分离纯化后最终得到目标胶原蛋白。
3.权利要求1所述采用胶原蛋白S-VCL-S制备水凝胶的方法，其特征在于：胶原蛋白S-VCL-S制备的具体步骤如下：
（1）设计胶原蛋白序列，将设计好的基因片段连接至pET-28a质粒上，并设计双酶切位点，以验证携带的基因片段；
（2）采用已经验证片段的pET-28a质粒转化大肠杆菌BL21（DE3），挑取单克隆进行蛋白表达测试，验证其转化结果；
（3）挑取单克隆依次进行摇瓶发酵生产、分离纯化，最后得到目标胶原蛋白。
4.权利要求1所述方法制备所得水凝胶的应用，其特征是：将其应用于制备缓释亲水性药物的载体，并且具有氧化还原响应性，能够响应H2O2氧化发生分子相变。
5.权利要求1所述方法制备所得水凝胶的应用，其特征是：将其应用于制备细胞支架材料，能够支持细胞的粘附和增殖。
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