[发明专利]一种萝卜与甘蓝型油菜属间杂交转移抗根肿病基因的方法

说明书

本发明公开了一种萝卜与甘蓝型油菜属间杂交转移抗根肿病基因的方法，具体包括以下步骤：抗病萝卜的鉴定和筛选；甘蓝型油菜与抗病萝卜的远缘杂交：利用有性杂交与子房培养相结合的方法获得属间杂交种，以获得抗根肿病的桥梁材料；杂交种与甘蓝型油菜回交筛选：对F1代真杂种加倍处理得到Ssubgt;0/subgt;，并与甘蓝型油菜回交，对BC1代进行抗性鉴定，筛选抗病植株，作为继续培育油菜抗病品种的中间材料。本发明通过抗病性鉴定、有性杂交和子房培养方法，结合形态学、细胞学及分子检测技术，将萝卜中的抗根肿病基因导入到油菜中，育种家多年选育获得高抗优质油菜品种，用于油菜根肿病发病较高的地区农户种植，提高种植收益。

技术领域

本发明涉及抗病植物技术领域，更具体的说是涉及一种萝卜与甘蓝型油菜属间杂交转移抗根肿病基因的方法。

背景技术

根肿病(Clubroot)俗称根瘤病，即植物的根部肿大变形，类似肿瘤状。该病主要发生在十字花科作物上，由原生生物芸薹根肿菌(P.brassicae Woron)侵染其根部引起，是一种历史久远、难于防治的世界性土传病害。芸薹根肿菌可以侵染几乎所有的十字花科作物，栽培类作物受影响更为严重，包括所有的甘蓝品种、油菜、芜菁类。植株受侵染后，初期不会表现出症状，一段时间后，根部薄壁细胞开始出现不正常分裂，细胞变得肿大，形成所谓的肿瘤，严重者主侧须根上均形成瘤状肿大。

中国是世界油菜主产国，油菜也成为我国第一大油料作物，其不仅是作为食用油使用，并且也是重要的工业原料和可再生能源的主要生物资源，因此油菜产业在我国种植业结构中占有非常重要的地位。由于我国引入甘蓝型油菜的时间并不长，生产上应用的油菜品种大多不抗根肿病。因此，根肿病已成为我国油菜产业的重大威胁因子。油菜苗期和成熟期均可感染根肿病，苗期感染率为17％，成熟期平均发病率为15％，而15％的发病率即可使产量损失达10.2％。在我国发病严重的区域，发病率要远高于15％，其产量和经济损失是巨大的。

目前传统农业防治不能取得良好的效果。化学防治是应用最多的方法，但药剂的成本较高，生产上很难承受，种植抗病品种是公认的防治根肿病最为安全有效的方式。自然甘蓝型油菜在长期的进化和驯化工程中，遗传多样性并不丰富，遗传资源越来越匮乏，大部分的抗性存在于其祖先二倍体芸薹属物种芜菁，黑芥和甘蓝中，且培育出得抗病品种通常具有生理小种特异性，加之病原菌变异迅速，使得其抗性不能持久。到目前为止，已经通过芸薹属物种的抗性基因的渐渗开发了一些抗根肿病的蔬菜品种。然而，很少有抗性油菜品种的报道。Diederichsen(2009)通过将来自芜菁(B.rapa)和羽衣甘蓝(B.oleracea)的抗性基因转移到其中培育出第一个抗性油菜品种“Mendel”。但野外抗性在田间迅速被打破，可能是由于强烈的选择压力。

因此，如何提供一种萝卜与甘蓝型油菜属间杂交转移抗根肿病基因的方法是本领域技术人员亟需解决的技术问题。

发明内容

有鉴于此，本发明提供了一种萝卜与甘蓝型油菜属间杂交转移抗根肿病基因的方法，筛选出对多个根肿菌小种抗病的萝卜材料，并与感病甘蓝型油菜杂交，以获得抗根肿病的中间材料，用于抗病甘蓝型油菜品种的选育，既丰富抗性基因的种类，增加油菜抗根肿病的效率和抗谱。本发明通过抗病性鉴定、有性杂交和子房培养方法，结合形态学、细胞学及分子检测技术，将萝卜中的抗根肿病基因导入到油菜中，育种家多年选育获得高抗优质油菜品种，用于油菜根肿病发病较高的地区农户种植，提高种植收益。

为了实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种萝卜与甘蓝型油菜属间杂交转移抗根肿病基因的方法，具体包括以下步骤：

S1、抗病萝卜的鉴定和筛选：萝卜抗源通过接种重病区的根肿菌，再经抗病性鉴定，筛选出抗性强的萝卜品种，为油菜抗根肿病育种提供抗源材料；

S2、甘蓝型油菜与抗病萝卜的远缘杂交：利用有性杂交与子房培养相结合的方法获得属间杂交种，以获得抗根肿病的桥梁材料；