[发明专利]一种萝卜与甘蓝型油菜属间杂交转移抗根肿病基因的方法有效
申请号: | 202011454586.0 | 申请日: | 2020-12-10 |
公开(公告)号: | CN112586345B | 公开(公告)日: | 2023-04-11 |
发明(设计)人: | 万林生;孙红芹;倪正斌;韩配配;孙明法;严国红;朱国永;王爱民;唐红生;刘凯;施伟;孙一标;张桂云;赵绍路;朱静雯;代金英;宛柏杰;胡蕾 | 申请(专利权)人: | 江苏沿海地区农业科学研究所 |
主分类号: | A01H1/02 | 分类号: | A01H1/02;A01H1/04;C12Q1/6895;C12Q1/686;G01N15/14;G01N1/28 |
代理公司: | 北京慕达星云知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 11465 | 代理人: | 赵徐平 |
地址: | 224000 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 萝卜 甘蓝 油菜 属间杂交 转移 根肿病 基因 方法 | ||
1.一种萝卜与甘蓝型油菜属间杂交转移抗根肿病基因的方法,其特征在于,具体包括以下步骤:
S1、抗病萝卜的鉴定和筛选:萝卜抗源通过接种重病区的根肿菌,再经抗病性鉴定,筛选出抗性强的萝卜品种,为油菜抗根肿病育种提供抗源材料;
S2、甘蓝型油菜与抗病萝卜的远缘杂交:利用有性杂交与子房培养相结合的方法获得属间杂交种,以获得抗根肿病的桥梁材料;在步骤S2中,以甘蓝型油菜为母本,抗病萝卜为父本,进行有性杂交;
S3、杂交种与甘蓝型油菜回交筛选:对步骤S2得到的F1代真杂种加倍处理得到S0,并与甘蓝型油菜回交,得到BC1代;
对BC1代进行抗性鉴定,筛选抗病植株,作为继续培育油菜抗病品种的中间材料;
在步骤S2中,结合形态学,细胞学,分子生物学手段检测杂交种的真实性;
在步骤S2中,所述子房培养的培养基为添加水解酪蛋白的MS培养基;
所述MS培养基包括浓度为0.05-0.1%的水解酪蛋白,浓度为0.8-1.0%的琼脂,以及浓度为3.0-5.0%的蔗糖;
采用EpicsAltra流式细胞仪对杂种植株及其亲本的细胞DNA含量进行测定分析;
采用分子标记开发、亲本和F1DNA提取、PCR扩增进行分子标记检测。
2.根据权利要求1所述的一种萝卜与甘蓝型油菜属间杂交转移抗根肿病基因的方法,其特征在于,在步骤S1中,萝卜抗源选自东北、华北、西南地区。
3.根据权利要求1所述的一种萝卜与甘蓝型油菜属间杂交转移抗根肿病基因的方法,其特征在于,在步骤S2中,按生长期长短种植油菜与萝卜品种,保证其花期相遇,在开花前一天将发育良好的油菜花蕾去雄,然后取父本萝卜当天开放的新鲜花粉,涂抹在甘蓝型油菜的柱头上后套袋,重复三天,授粉后一周,去除纸袋,一部分植株留在田间不再做其他处理,另一部分采集回实验室,作子房培养处理。
4.根据权利要求1所述的一种萝卜与甘蓝型油菜属间杂交转移抗根肿病基因的方法,其特征在于,通过染色体制片观察、秋水仙素加倍、花粉育性检测和亲本及BC1根肿病抗性检测获得具有根肿病抗性的种子。
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