[发明专利]鉴定牙周膜干细胞的试剂盒及方法

说明书

本发明提供了一种鉴定牙周膜干细胞的试剂盒及方法，涉及生物技术领域，本发明的发明人通过实验发现，CKB基因和/或CKB蛋白在牙周膜干细胞中具有显著高表达的特性，因此，通过检测CKB基因和/或CKB蛋白在待测细胞样品中的表达情况，能够准确、有效地鉴定牙周膜干细胞。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，尤其是涉及一种鉴定牙周膜干细胞的试剂盒及方法。

背景技术

随着干细胞和再生医学的兴起，针对干细胞的基础和应用研究层出不穷。从胚胎干细胞，造血干细胞，骨髓干细胞到诱导多功能干细胞，都被验证为潜在的临床材料。口腔干细胞在近几年开始兴起。从21世纪开始，陆陆续续共有8种干细胞从人的牙科组织中被分离出来。

牙周膜干细胞（PDLSCs）作为口腔干细胞的一种，可以从成人的牙周膜组织中得到，材料可以来源于牙科手术丢弃物中得到。研究表明，相比于其他干细胞，PDLSCs同样具有高度增殖和多向分化的潜能，可以在适当条件下分化成骨，成脂等。另外，PDLSCs不具有伦理问题，也无致瘤性，故而被视为胚胎干细胞和诱导多功能干细胞的潜在替代物。

PDLSCs从组织中的分离培养过程，需要克服很多困难。口腔组织环境复杂，组织之间除了牙冠的包被以外没有明显界限。故而在从组织提取PDLSCs时，需要避免组织之间的污染，才能得到牙周膜组织。另外，由于口腔组织中可以分离得到多种干细胞，他们在免疫表型，增殖和分化能力又大都相似，市场上也没有相应的产品和方法报道，用来区分表征牙周膜干细胞并与其他细胞做区分。

有鉴于此，特提出本发明。

发明内容

本发明的第一个目的在于提供一种鉴定牙周膜干细胞的试剂盒，以至少缓解了现有技术中存在的技术问题之一。

本发明的第二个目的在于提供一种鉴定牙周膜干细胞的方法。

本发明提供了一种鉴定牙周膜干细胞的试剂盒，所述试剂盒包括用于检测CKB基因和/或CKB蛋白的产品。

进一步的，包括用于检测CKB基因的引物。

进一步的，所述用于扩增CKB基因的引物具有SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列，或与SEQ ID NO.1和/或SEQ ID NO.2具有至少85%同一性的核苷酸序列。

进一步的，所述用于扩增CKB基因的引物具有SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的核苷酸序列，或与SEQ ID NO.3和/或SEQ ID NO.4具有至少85%同一性的核苷酸序列。

进一步的，所述用于扩增CKB基因的引物具有SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示的核苷酸序列，或与SEQ ID NO.5和/或SEQ ID NO.6具有至少85%同一性的核苷酸序列。

进一步的，所述用于扩增CKB基因的引物具有SEQ ID NO.7和SEQ ID NO.8所示的核苷酸序列，或与SEQ ID NO.7和/或SEQ ID NO.8具有至少85%同一性的核苷酸序列。

进一步的，所述用于扩增CKB基因的引物具有SEQ ID NO.9和SEQ ID NO.10所示的核苷酸序列，或与SEQ ID NO.9和/或SEQ ID NO.10具有至少85%同一性的核苷酸序列。

进一步的，所述用于扩增CKB基因的引物具有SEQ ID NO.11和SEQ ID NO.12所示的核苷酸序列，或与SEQ ID NO.11和/或SEQ ID NO.12具有至少85%同一性的核苷酸序列。

进一步的，所述试剂盒还包括内参基因的检测引物。

进一步的，所述内参基因包括GAPDH。