[发明专利]检测VEGF位点靶向药对肠癌类器官影响的方法

说明书

本发明公开了一种检测VEGF位点靶向药对肠癌类器官影响的方法，该方法包括如下步骤：1)以传代消化液消化15‑25min；2)以微器官为单位均匀分配入微孔板中；3)类器官铺板培养22‑26h后换为含药培养基；4)采用CellTiter‑Glo试剂盒检测用药后类器官活力。本发明的检测VEGF位点靶向药对肠癌类器官影响的方法具有：温和的消化液减少此步骤对类器官的伤害；以微器官为单位进行药筛，更好的模拟临床用药后体内癌组织的反应；铺板后正常培养22‑26h，使类器官生长状态稳定后接受药物作用，更贴近体内用药状态；采用CellTiter‑Glo试剂盒检测细胞活力，结果更高效和准确。

技术领域

本发明涉及生物医药领域，尤其涉及一种检测VEGF位点靶向药对肠癌类器官影响的方法。

背景技术

目前，检测VEGF位点靶向药对肠癌类器官影响的方法主要有以下几种：

1)癌症细胞系用药实验

细胞系体外生长环境与体内环境有显著不同，且多为商业化的通用细胞系，个性化程度低，无法准确模拟实际肿瘤对药物的反应，也无法做到个性化。

2)临床人体用药疗效统计分析

临床用药时间周期通常以年为单位，试验周期长，且成本高昂。

3)肠癌类器官用药实验

目前已使用肠癌类器官为模型检测多种常用的肠癌化疗药物(不包括本专利所检测药物)的效果，证实与临床效果接近，参考文献如下：

Schütte M,Risch T,Abdavi-Azar N,Boehnke K,Schumacher D,Keil M,Yildiriman R,Jandrasits C,Borodina T,Amstislavskiy V,Worth CL,Schweiger C,Liebs S,Lange M,Warnatz HJ,Butcher LM,Barrett JE,Sultan M,Wierling C,Golob-Schwarzl N,Lax S,Uranitsch S,Becker M,Welte Y,Regan JL,Silvestrov M,Kehler I,Fusi A,Kessler T,Herwig R,Landegren U,Wienke D,Nilsson M,Velasco JA,Garin-Chesa P,Reinhard C,Beck S,Sch fer R,Regenbrecht CR,Henderson D,Lange B,Haybaeck J,Keilholz U,Hoffmann J,Lehrach H,Yaspo ML.Molecular dissection ofcolorectal cancer in pre-clinical models identifies biomarkers predictingsensitivity to EGFR inhibitors.Nat Commun.2017Feb 10；8:14262.doi:10.1038/ncomms14262.PMID:28186126；PMCID:PMC5309787。

发明内容

针对现有技术中存在的上述不足，本发明提供了一种检测VEGF位点靶向药对肠癌类器官影响的方法，该方法更快速和直观的反映靶向VEGF位点的靶向药对肠癌类器官的作用，该方法使用成本更低，且该方法能得到更接近临床且具有个性化的药效结果。

为了解决上述技术问题，本发明采用了如下技术方案：

检测VEGF位点靶向药对肠癌类器官影响的方法，该方法包括如下步骤：

1)以传代消化液消化15-25min；

2)以微器官为单位均匀分配入微孔板中；

3)类器官铺板培养22-26h后换为含药培养基；