[发明专利]一种增加蝙蝠蛾拟青霉发酵菌丝体中腺苷含量的方法

说明书

本发明公开了一种增加蝙蝠蛾拟青霉发酵菌丝体中腺苷含量的方法，包括菌种活化、种子液的制备、发酵罐发酵和提取步骤，所述发酵步骤采用的发酵培养基为：黄豆饼粉20g‑25g/L，葡萄糖10g‑15g/L，蔗糖10g‑15g/L，磷酸二氢钾0.3‑0.5g/L，MgSO₄·7H₂O0.2g‑0.4g/L，无水氯化钙0.25g/L，豆油0.4g/L，肌苷酸0.02‑0.1g/L，余量为水。本发明在发酵培养基中添加肌苷酸，不仅可以提高蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉中的腺苷含量，还能提高蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉产量。

技术领域

本发明属于食品保健品微生物技术领域，涉及一种增加蝙蝠蛾拟青霉发酵菌丝体中腺苷含量的方法。

背景技术

冬虫夏草是多种寄生真菌生长在虫体之上的复合体；在我国主要分布在西藏地区，此外在云南、四川、甘肃、新疆也有分布；是一种珍贵的食药用真菌。其体内不仅含有丰富的营养物质，还含有能够对人体多种疾病有预防和治疗功效的功能性成分；比如核苷类、甾醇类、虫草素类等。但由于生长条件等影响，冬虫夏草产量极低，在市场上供不应求。

腺苷是冬虫夏草中主要的功能性成分，它做为一种内源性核苷广泛分布在人体之中，对人体的许多系统和组织都具有重要的生理学功能。腺苷可通过核苷类物质的代谢途径参与到人体的免疫和代谢系统之中，对心血管疾病、慢性支气管炎、肝硬化、高血脂等疾病有显著的预防和治疗功效，同时腺苷也是虫草类产品质量评价的一项重要指标。

蝙蝠蛾拟青霉(虫草)是一株从冬虫夏草中分离出来的寄生真菌，利用蝙蝠蛾拟青霉菌株通过深层液态发酵法产生的蝙蝠蛾拟青霉菌丝体中含有与冬虫夏草一致的功能性成分，其优势在于能够人工控制产生大量的菌丝体，同时菌丝体做为蝙蝠蛾拟青霉的初始形态，其多种功能性成分的含量高于子实体。此外，蝙蝠蛾拟青霉菌丝体中的腺苷含量也是考察蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉质量水平主要指标之一(中国药典规定腺苷含量≥0.2％为合格虫草菌粉)。

肌苷酸(IMP)又名次黄嘌呤核苷酸，是在RNA中发现的一种核苷酸，目前许多研究表明其具有风味特性。在细菌核苷类物质代谢中，肌苷酸被发现是腺苷重要的前体物质，其对于腺苷的代谢可能具有一定的影响作用；在真菌的腺苷代谢过程中，肌苷酸是否也是前体物质，能否对腺苷的提升产生一定的影响还没有相关报道。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提升现有产品的质量水平，提供一种增加蝙蝠蛾拟青霉发酵菌丝体中腺苷含量的方法。本发明在发酵培养基中添加腺苷代谢途径中可能的前体物食品级肌苷酸(IMP)，不仅可以提高蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉中的腺苷含量，还能提高蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉产量。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种增加蝙蝠蛾拟青霉发酵菌丝体中腺苷含量的方法，包括菌种活化、种子液的制备、发酵罐发酵和提取步骤，所述发酵步骤采用的发酵培养基为：黄豆饼粉20g-25g/L，葡萄糖10g-15g/L，蔗糖10g-15g/L，磷酸二氢钾0.3-0.5g/L，MgSO₄·7H₂O0.2g-0.4g/L，无水氯化钙0.25g/L，豆油0.4g/L，肌苷酸0.02-0.07g/L，余量为水。在发酵培养基中添加肌苷酸0.02-0.1g/L，优选添加肌苷酸0.02-0.07g/L。在发酵培养基中添加一定量的肌苷酸不仅可以提高蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉中的腺苷含量，还能提高蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉产量。此外，肌苷酸的量加入过少不能对腺苷积累产生积极影响，加入肌苷酸的量过多会发生反馈抑制，明显降低蝙蝠蛾拟青霉菌丝体粉中的腺苷含量。

优选所述的菌种活化是将蝙蝠蛾拟青霉菌的原始菌株接种在斜面培养基上，于18℃-26℃培养72小时，制备活化后的斜面种子。

优选所述斜面培养基组成为:麸皮50g/L，葡萄糖20g/L，蛋白胨2g/L，KH₂PO₄1g/L,硫酸镁0.3g/L，琼脂粉15g/L。