[发明专利]利用液态热响应型聚合物EO20 在审
| 申请号： | 202011307539.3 | 申请日： | 2020-11-20 |
| 公开（公告）号： | CN112321704A | 公开（公告）日： | 2021-02-05 |
| 发明（设计）人： | 曹学君;万俊芬;陈曦 | 申请（专利权）人： | 华东理工大学 |
| 主分类号： | C07K16/00 | 分类号： | C07K16/00;C07K1/14 |
| 代理公司： | 上海智信专利代理有限公司 31002 | 代理人： | 王洁;豆欣欣 |
| 地址： | 200237 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 利用 液态 响应 聚合物 eo base sub 20 | ||
【权利要求书】：
1.一种利用液态热响应型聚合物EO20PO80分离纯化单克隆抗体的方法，其特征在于，所述的方法包括：
正向萃取步骤：将EO20PO80与单克隆抗体细胞培养液按照1:3的体积比混合均匀，并调节pH至9.0，静置于40℃水浴锅30分钟后，即可分成上下界面清晰的两相，取出离心，并将上相萃余液去除；
反向萃取步骤：加入与正向萃取步骤中的下相等体积的25mM柠檬酸-柠檬酸钠缓冲体系，并加入正向萃取步骤中加入的EO20PO80等体积的水，混合均匀并调节pH至4.5，静置于40℃水浴锅，直至形成上下界面清晰的两相，经过反向萃取，单克隆抗体富集于上相水溶液中。
2.根据权利要求1所述的利用液态热响应型聚合物EO20PO80分离纯化单克隆抗体的方法，其特征在于，所述的单克隆抗体为利妥昔单克隆抗体或曲妥珠单克隆抗体。
3.根据权利要求1所述的利用液态热响应型聚合物EO20PO80分离纯化单克隆抗体的方法，其特征在于，反向萃取步骤得到的下相，放置于50℃中按照1:1体积比加入0.1MNaOH溶液，加热30分钟，除去残留在EOPO中的杂质，回收热响应型聚合物EO20PO80。
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