[发明专利]抗胞囊线虫转基因大豆事件ZHs1-2外源插入片段侧翼序列及其应用有效
| 申请号： | 202011233974.6 | 申请日： | 2020-11-07 |
| 公开（公告）号： | CN112359038B | 公开（公告）日： | 2022-03-11 |
| 发明（设计）人： | 唐桂香;钟宣伯;刘璐璐;崔楠;李建飞;舒跃 | 申请（专利权）人： | 浙江大学 |
| 主分类号： | C12N15/11 | 分类号： | C12N15/11;C12N15/10;C12Q1/6895 |
| 代理公司： | 杭州中成专利事务所有限公司 33212 | 代理人： | 金祺 |
| 地址： | 310058 浙江*** | 国省代码： | 浙江;33 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 胞囊 线虫 转基因 大豆 事件 zhs1 插入 片段 侧翼 序列 及其 应用 | ||
1.抗胞囊线虫转基因大豆事件ZHs1-2外源插入片段侧翼，其特征在于：左边界侧翼的500bp如SEQ ID NO:1所述；右边界侧翼的500bp如SEQ ID NO:2所述。
2.根据权利要求1所述的抗胞囊线虫转基因大豆事件ZHs1-2外源插入片段侧翼，其特征在于：由来源于大豆基因组序列和来源于外源插入片段序列组成的DNA序列，如SEQ IDNO:5所述。
3.如权利要求1或2所述的抗胞囊线虫转基因大豆事件ZHs1-2外源插入片段侧翼的制备方法，其特征在于：提取转基因大豆事件ZHs1-2基因组DNA，利用基因组重测序技术分析确定外源片段插入位点，并通过PCR扩增获得。
4.如权利要求1或2所述的抗胞囊线虫转基因大豆事件ZHs1-2外源插入片段侧翼的用途，其特征在于：检测待测样品是否含有来源于ZHs1-2的成分。
5.根据权利要求4所述的用途，其特征在于：
ZHs1-2左 边 界 检 测 引 物 为：
正向引物LB-F1为： F: 5’-ATGCACTATTCAAATAGGAGCA-3’，
反向引物LB-R1为： 5’- ATTCAGTACATTAAAAACGTCCG -3’；
当扩增获得821bp片段时，判定待测样品中含有来源于ZHs1-2的成分；反之，则不含。
6.根据权利要求5所述的用途，其特征在于：
ZHs1-2右边界检测引物为：
正向引物为：5’- CCCGATCGTTCAAACATT-3’ ，
反向引物为： 5’- CTCATCTCCTCTTATGAATAGACTA -3’；
当扩增获得1184bp片段时，判定待测样品中含有来源于ZHs1-2的成分；反之，则不含。
7.根据权利要求5或6所述的用途，其特征在于：
所述待测样品包括ZHs1-2的亲本、衍生品系或品种对应的植株、组织或种子。
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