[发明专利]针对疑难检材的补充STR位点复合扩增试剂盒及其应用

权利要求书

1.针对疑难检材的补充STR位点复合扩增试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包含17对STR基因座的特异性扩增引物，其中STR基因座为：Amelogenin、D3S1358、D6S477、D1S1656、D19S253、D2S441、D6S1043、D15S659、D3S3045、Penta E、D8S1132、Penta D、D10S1435、D22S1045、D10S1248、D12S391和DYS391。

2.根据权利要求1所述的针对疑难检材的补充STR位点复合扩增试剂盒，其特征在于，所述17对STR基因座的特异性扩增引物序列如下：D3S1358、SEQ ID NO.1～2；D6S477、SEQID NO.3～4；D1S1656、SEQ ID NO.5～6；D19S253、SEQ ID NO.7～8；D2S441、SEQ ID NO.9～10；D6S1043、SEQ ID NO.11～12；D15S659、SEQ ID NO.13～14；D3S3045、SEQ ID NO.15～16；Amelogenin、SEQ ID NO.17～18；Penta E、SEQ ID NO.19～20；D8S1132、SEQ ID NO.21～22；DYS391、SEQ ID NO.23～24；Penta D、SEQ ID NO.25～26；D10S1435、SEQ ID NO.27～28；D22S1045、SEQ ID NO.29～30；D10S1248、SEQ ID NO.31～32；D12S391、SEQ ID NO.33～34。

3.根据权利要求1所述的针对疑难检材的补充STR位点复合扩增试剂盒，其特征在于，所述17对STR基因座的特异性扩增引物的浓度如下：D3S1358引物对0.30μM；D6S477引物对0.27μM；D1S1656引物对0.30μM；D19S253、0.30μM；D2S441、0.32μM；D6S1043、0.44μM；D15S659、0.32μM；D3S3045、0.33μM；Amelogenin、0.25μM；Penta E、0.40μM；D8S1132、0.37μM；DYS391、0.32μM；Penta D、0.32μM；D10S1435、0.37μM；D22S1045、0.26μM；D10S1248、0.37μM；D12S391、0.32μM。

4.根据权利要求1所述的针对疑难检材的补充STR位点复合扩增试剂盒，其特征在于，所述17对STR基因座的特异性扩增引物的PCR扩增产物长度均小于320bp。

5.根据权利要求1所述的针对疑难检材的补充STR位点复合扩增试剂盒，其特征在于，所述17对STR基因座的特异性扩增引物分为5组：第1组，D3S1358、D6S477、D1S1656和D19S253；第2组，D2S441、D6S1043、D15S659和D3S3045；第3组，Amelogenin、Penta E和D8S1132；第4组，DYS391、Penta D和D10S1435；第5组，D22S1045、D10S1248和D12S391；每对引物中至少一条采用荧光染料标记其5’端。

6.根据权利要求1所述的针对疑难检材的补充STR位点复合扩增试剂盒，其特征在于，所述荧光染料为6-FAM、HEX、SUM、LYN、PUR中任意一种，且每组采用的荧光标记不同。

7.根据权利要求1所述的针对疑难检材的补充STR位点复合扩增试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括：基因组DNA，10ng；PCR缓冲液Master Mix，2mL；sdH₂O，1.95mL；PCR增强剂；其中，PCR缓冲液Master Mix成分为：热启动Taq酶0.2U/μL～0.5U/μL，pH8.25～8.4的Tris-HCl 50mM～125mM,dNTPs 5.0mM～7.5mM,KCl 50mM～125mM，BSA 2mg/ml～5mg/ml；PCR增强剂为明胶、聚乙二醇、二甲亚砜、Triton X-100和二硫苏糖醇中的至少一种。