[发明专利]一种脂肪醇乙酰壳二糖和脂肪醇N-乙酰葡糖胺的制备方法

说明书

本发明公开了一种脂肪醇乙酰壳二糖和脂肪醇N‑乙酰葡糖胺的制备方法，其中，脂肪醇乙酰壳二糖和脂肪醇N‑乙酰葡糖胺的制备方法，其包括如下步骤：脱保护1、磷酸化1、脱保护2、脱保护3、不对称加氢、磷酸化2、耦合、脱保护4。本发明提供一种能够实现N‑糖基化产物的合成的方法，且反应过程中各反应条件温和可控，制备难度低。

技术领域

本发明涉及化学合成技术领域，特别是涉及一种脂肪醇乙酰壳二糖和脂肪醇N-乙酰葡糖胺的制备方法。

背景技术

N-糖基化是较为常见的蛋白质修饰方式，对蛋白质的结构稳定性和功能多样性起到重要作用。蛋白质的N-糖基化起始于内质网上多萜醇寡糖前体的合成，该过程由一系列的糖基转移酶(Alg)催化完成。人体中Alg蛋白的异常表达会导致先天性糖基化疾病。因此Alg蛋白的性质解析和活性分析在生物学和医学领域都具有重要的意义。多萜醇乙酰壳二糖和多萜醇N-乙酰葡糖胺是多萜醇寡糖前体合成途径中的重要中间体，但是由于其含量极少，提取和分离难度大，迄今没有大量提取天然多萜醇乙酰壳二糖的报道。目前为止，科学家们解析DLO途径及研究相关Alg蛋白的活性都是通过体外合成的多萜醇寡糖类似物进行。

1992年，Flitsch小组报道了多萜醇乙酰壳二糖类似物植烷醇乙酰壳二糖的合成。但本课题组发现人源Alg1蛋白不识别该底物，推测原因为人源Alg1蛋白对天然底物中的多萜醇具有较高的特异性。为研究人源Alg的活性和性质，需要获得其天然底物多萜醇寡糖。

为了开发结构简化的多萜醇寡糖结构类似物，为后续系统的在体外进行内质网内糖基转移酶活性测试打下基础。因此开发一条合成天然底物多萜醇乙酰壳二糖和多萜醇N-乙酰葡糖胺在内的脂肪醇乙酰壳二糖和脂肪醇N-乙酰葡糖胺的合成途径具有重要的意义

发明内容

本部分的目的在于概述本发明的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和发明名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和发明名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本发明的范围。

鉴于上述和/或现有脂肪醇乙酰壳二糖和脂肪醇N-乙酰葡糖胺制备过程中存在的问题，提出了本发明。

因此，本发明其中一个目的是，克服现有脂肪醇乙酰壳二糖和脂肪醇N-乙酰葡糖胺的制备方法的不足，提供一种新型脂肪醇乙酰壳二糖和脂肪醇N-乙酰葡糖胺的制备方法。

为解决上述技术问题，根据本发明的一个方面，本发明提供了如下技术方案：一种脂肪醇乙酰壳二糖和脂肪醇N-乙酰葡糖胺的制备方法，其包括如下步骤：

脱保护1：将全乙酰化的壳二糖或N-乙酰葡糖胺1溶于N,N-二甲基甲酰胺中，加入二甲胺溶液，反应生成中间体2；

磷酸化1：将中间体2溶于无水四氢呋喃中与二异丙基氨基锂反应，接着与焦磷酸四苄基酯反应得到中间体3；

脱保护2：将中间体3溶于无水甲醇与无水二氯甲烷的混合溶液中，在钯碳与氢气的作用下，得到中间体4；

脱保护3：在聚戊烯醇乙酸酯5中加入氢氧化钾乙醇溶液加热反应，得到中间体6；

不对称加氢：将中间体6或8与氢氧化钾溶于无水异丙醇溶液中，在钌盐催化下，加热反应生成中间体7或9；

磷酸化2：将中间体10，磷酸二氢四叔丁基氨和三氯乙腈溶于无水二氯甲烷反应，接着溶于四氢呋喃与氨水反应，最后加入甲醇甲苯混合溶液中，得到中间体11；

耦合：将中间体4与N,N-羰基二咪唑溶于无水N,N-二甲基甲酰胺中反应，接着加入中间体11的二氯甲烷溶液，得到中间体12；

脱保护4：将中间体12溶于甲醇溶液，加入碱性试剂反应得到脂肪醇乙酰壳二糖或脂肪醇N-乙酰葡糖胺13。