[发明专利]全细胞疫苗及其制备方法与应用

权利要求书

1.一种全细胞疫苗，其特征在于，所述全细胞疫苗包括：肿瘤细胞、TLR7小分子激动剂分子以及偶联链分子。

2.根据权利要求1所述的全细胞细胞，其特征在于，所述全细胞疫苗采用偶联链分子连接肿瘤细胞及TLR7小分子激动剂分子，结构通式如下所示：

其中，n代表偶联度，选自1×10²～1×10⁷。

3.根据权利要求1所述的全细胞疫苗，其特征在于，所述TLR7小分子激动剂分子的结构通式如下所示：

其中，R₁选自取代的芳香环基功能基团、芳香六元环或五元环中的至少一种；R₂选自丁氧基、取代的丁氧基、丁胺基、取代的丁胺基、丁硫基基团中的至少一种。

4.根据权利要求3所述的全细胞疫苗，其特征在于，所述TLR7小分子激动剂分子的结构式选自以下结构式的任意一种，

5.根据权利要求1所述的全细胞疫苗，其特征在于，所述偶联链分子选自C1～C20的直链烷基链分子、C1～C20的支链烷基链分子、含有氨基的可溶性C1～C20的直链烷基链分子、含有氨基的可溶性C1～C20的支链烷基链分子中的至少一种。

6.一种全细胞疫苗的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

根据权利要求1～5任一所述的全细胞疫苗，提供肿瘤细胞、TLR7小分子激动剂分子和偶联链分子；

采用活化酯法将所述TLR7小分子激动剂分子和所述偶联链分子进行酯化得到TLR7小分子激动剂-偶联链活化酯分子或采用带NCS功能基的TLR7小分子激动剂；将所述肿瘤细胞进行消化处理得到肿瘤单细胞；

将所述TLR7小分子激动剂-偶联链活化酯分子或所述带NCS功能基的TLR7小分子激动剂和所述肿瘤单细胞进行混合处理，得到偶联后的肿瘤单细胞；

将所述偶联后的肿瘤单细胞进行灭活处理，得到所述全细胞疫苗。

7.根据权利要求6所述的全细胞疫苗的制备方法，其特征在于，所述肿瘤单细胞的细胞浓度为3×10⁷～3.5×10⁷/mL；和/或，所述全细胞疫苗中的细胞浓度为1×10⁷～1.5×10⁷/mL。

8.根据权利要求6所述的全细胞疫苗的制备方法，其特征在于，将所述TLR7小分子激动剂-偶联链分子活化酯或所述带NCS功能基的TLR7小分子激动剂和所述肿瘤单细胞进行混合处理的步骤中，将所述TLR7小分子激动剂-偶联链分子和所述肿瘤单细胞于25～28℃、1400～1500rpm的条件下振荡反应1～1.5小时；和/或，将所述偶联后的肿瘤单细胞进行灭活处理的步骤中，将所述偶联后的肿瘤单细胞采用照射强度为6000～6500μW/cm²的254nm紫外线辐照灭活45～50min。

9.一种全细胞疫苗的应用，其特征在于，所述全细胞疫苗在制备抗肿瘤药物中的应用，其中，所述全细胞疫苗为权利要求1～5任一所述的全细胞疫苗或由权利要求6～8任一所述的全细胞疫苗的制备方法制备得到的。

10.根据权利要求9所述的全细胞疫苗的应用，其特征在于，所述全细胞疫苗在制备抗肿瘤药物中的应用包括：采用所述全细胞疫苗单独应用；和/或，

采用所述全细胞疫苗负载树突状细胞的免疫细胞回输治疗的应用；和/或，

采用所述全细胞疫苗与铝佐剂、乳化佐剂、纳米佐剂或与药物载体或其他药物活性成分组合，制成各种药学上可接受的制剂进行应用。