[发明专利]一种用于膀胱癌诊断与治疗的双靶向纳米团簇、制备方法及应用有效
| 申请号： | 202011095181.2 | 申请日： | 2020-10-14 |
| 公开（公告）号： | CN112263676B | 公开（公告）日： | 2023-04-07 |
| 发明（设计）人： | 许传亮;李威;薛永平;何星;刘安伟;熊巧;曾蜀雄;戴利和;应毅蝶;陶万茹 | 申请（专利权）人： | 上海长海医院 |
| 主分类号： | A61K39/395 | 分类号： | A61K39/395;A61K47/59;A61P35/00;A61K49/00;B82Y5/00;B82Y40/00 |
| 代理公司： | 上海怡恩专利代理事务所(普通合伙) 31336 | 代理人： | 潘青青 |
| 地址： | 200433 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 用于 膀胱癌 诊断 治疗 靶向 纳米 制备 方法 应用 | ||
1.一种用于膀胱癌诊断与治疗的双靶向纳米团簇，其特征在于：由多个巯基化的抗CD47和PD-L1抗体通过MAL-PEG-SCM偶联到支化型聚乙烯亚胺上，所述双靶向纳米免疫团簇中的骨架为聚乙烯亚胺PEI，铰链为马来酰亚胺-聚乙二醇-琥珀酰亚胺MAL-PEG-SCM，所述双靶向纳米免疫团簇中所含的抗体为抗CD47抗体和抗PD-L1抗体。
2.根据权利要求1所述的一种用于膀胱癌诊断与治疗的双靶向纳米团簇，其特征在于：所述双靶向纳米免疫团簇为树枝状，尺寸为100-200nm。
3.一种用于膀胱癌诊断与治疗的双靶向纳米团簇的制备方法，其特征在于：具体包括以下步骤：
S1、通过Traut's试剂分别将抗CD47抗体和抗PD-L1抗体实现巯基化；
S2、用异官能团修饰剂MAL-PEG-SCM修饰分子量为750kDa的支化型PEI，获得PEI-MAL-PEG-SCM溶液；
S3、用巯基化的抗CD47和PD-L1抗体与PEI-MAL-PEG-SCM溶液混合反应，制备得到双靶向纳米免疫团簇。
4.根据权利要求3所述的一种用于膀胱癌诊断与治疗的双靶向纳米团簇的制备方法，其特征在于：所述S1中将抗CD47抗体、抗PD-L1抗体溶液与Traut’s试剂分别按照摩尔比(1-2):(18-22)的比例在氮气环境下室温避光反应1h，并在MWCO3.5kDa透析袋室温透析30min，获得巯基化抗体aCD47-SH和aPD-L1-SH。
5.根据权利要求3所述的一种用于膀胱癌诊断与治疗的双靶向纳米团簇的制备方法，其特征在于：所述S2中将PEI溶液与MAL-PEG-SCM溶液按照质量比1:27室温避光反应48h，并在MWCO3.5kDa透析袋室温透析12h，得到PEI-MAL-PEG-SCM溶液。
6.根据权利要求4或5所述的一种用于膀胱癌诊断与治疗的双靶向纳米团簇的制备方法，其特征在于：将PEI-MAL-PEG-SCM、aCD47-SH、aPD-L1-SH按照摩尔比1:3000:3000的比例在氮气条件下4℃避光反应12h，用MWCO300kDa透析袋室温透析12h，获得的保留液即为双靶向纳米免疫团簇。
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