[发明专利]一种基于免疫缺陷小鼠脑瘫模型的细胞治疗研究方法

说明书

本发明涉及疾病治疗领域，尤其涉及一种基于免疫缺陷小鼠脑瘫模型的细胞治疗研究方法。本发明的研究方法为：研究脐带血MNC里A+细胞对脑瘫的治疗作用时，同时研究A‑细胞，即剔除A+细胞后剩余的MNC的治疗作用，如果A‑细胞也有治疗作用，则说明MNC中不只A+细胞有治疗脑瘫的作用；设定一种MNC中对治疗脑瘫可能起负调控作用的因素，假设为B+细胞，剔除B+细胞，用剩余的B‑细胞进行治疗脑瘫的研究。本发明在研究脐带血中某一种细胞对脑瘫的治疗作用时，考虑到剔除该细胞后剩余成分对脑瘫的治疗作用，以研究该种细胞是否为唯一作用因素。为研究脐带血及其成分治疗脑瘫提供了新的思路。

技术领域

本发明涉及疾病治疗领域，尤其涉及一种基于免疫缺陷小鼠脑瘫模型的细胞治疗研究方法。

背景技术

脑瘫(CP)是儿童时期最常见的神经肌肉疾病，可由产前或产后的脑损伤引起。CP有不同的亚型，包括共济失调、运动障碍、痉挛等等。脑瘫儿童表现出一系列复杂的功能障碍，包括行为障碍、感觉和知觉障碍、癫痫、智力迟钝和语言缺陷等。在CP患者中，还存在与其他严重问题并存的问题，例如骨密度和肌肉质量较低，神经肌肉效率低下等。目前，CP的治疗已经取得了很大的进展，包括对肌肉、肌腱、骨骼和神经的手术；治疗异常肌肉张力、睡眠障碍的药物治疗，等等。然而，这些治疗只提供症状缓解，其中一些还可能会引起患儿不适。因此，CP仍然没有治愈方法，仍然是儿科神经发育研究的一个迫切课题。

脑瘫是由各种原因所引起的婴儿在出生前后一个月内出现颅脑损伤或发育缺陷，进而导致的姿势异常或者运动障碍，属于非进行性脑损伤。这一观点尽管已经得到普遍认可，但是其产生的内在机制却并不得而知。成功地建立近似于人类脑瘫脑损伤机制与临床表现的动物模型是深入研究其发病机制，进行有效干预的基础。动物的选择是模型建立的首要条件，多脑回动物如狗、猪、羊、兔等因体积较大、饲养相对困难、费用较贵等原因限制了其在实验中的大量应用；与人类最接近的灵长类动物则更加昂贵和稀少，不适应实验研究应用；非多脑回动物如鼠类体形小、数量大、价格便宜、易饲养，行为表现多样，情绪反应敏感，且其脑体积小便于脑组织病理变化和生化改变的观察。因此目前国内外大多倾向采用大鼠作为脑瘫模型动物。

近年来，干细胞治疗作为CP治疗的一种新方法引起了人们的广泛关注。对于治疗许多疾病，特别是围产期脑损伤，使用脐带血(UCB)或脐带血单个核细胞(MNCs)研究表明，UCB可能有助于CP的治疗。UCB研究表明，UCB细胞可以迁移到CP大鼠脑内的损伤部位减少功能缺陷并保护其免受白质损伤。目前，超过20个临床试验正在研究UCB治疗脑瘫或脑损伤。与任何其他细胞类型相比，UCB细胞治疗脑瘫儿童的效果最大，在短期(6个月)随访有显著的干预效果。

人UCB-MNCs并非单纯的一种细胞，其中含有丰富的造血干细胞(HSCs)、间充质干细胞(MSCs)等多种干细胞和免疫细胞，有些科研工作者分离纯化其中的CD34+细胞或MSCs也做了治疗脑瘫的研究，也取得了不错的治疗效果。甚至有人对CD34+和MNCs进行了对比研究，发现纯化的CD34+细胞比MNCs治疗效果更好。

但是目前动物实验中所选用的动物都是常规动物，因其免疫功能正常，对于输入的脐带血成分有一定的免疫反应，从而影响研究结果。且现有研究主要考察的是短期治疗效果，尚未发现长期研究的报道。目前研究脐带血(或脐血单个核细胞)成分治疗脑瘫的作用，往往都是和脐血(或脐血单个核细胞)作比较研究，例如研究脐血单个核细胞(MNC)中CD34+细胞治疗脑瘫的效果就是和MNC作比较实验。但因为CD34+细胞来源于MNC，所以二者的比较研究可能证明CD34+细胞的治疗效果优于MNC，但不能确定CD34+细胞是MNC起治疗脑瘫作用的唯一因素。这样的研究方法容易使研究者错失MNC中优于CD34+细胞的更有利于脑瘫治疗的成分。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足，提供一种基于免疫缺陷小鼠脑瘫模型的细胞治疗研究方法。