[发明专利]一种基于免疫缺陷小鼠脑瘫模型的细胞治疗研究方法

权利要求书

1.一种基于免疫缺陷小鼠脑瘫模型的细胞治疗研究方法，其特征在于，所述方法为：研究脐带血MNC里A+细胞对脑瘫的治疗作用时，同时研究A-细胞，即剔除A+细胞后剩余的MNC的治疗作用，如果A-细胞也有治疗作用，则说明MNC中不只A+细胞有治疗脑瘫的作用；设定一种MNC中对治疗脑瘫可能起负调控作用的因素，假设为B+细胞，剔除B+细胞，用剩余的B-细胞进行治疗脑瘫的研究。

2.根据权利要求1所述的细胞治疗研究方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(1)从脐带血细胞中分离出CD34+细胞，同时保留去除CD34+细胞外的所有成分，即CD34-细胞；从脐带血细胞中分离出T淋巴细胞，同时保留去除T淋巴细胞外的所有成分，即T-细胞；

(2)基于人源化免疫缺陷小鼠构建脑瘫模型小鼠；

(3)将脑瘫模型小鼠分为4组，1组作为阴性对照，另外三组分别颅内注射CD34+细胞、CD34-细胞和T-细胞，并设移植1组小鼠作为阳性对照；

(4)移植完成8周后，5组小鼠平行进行分析，分析比较不同治疗方式的差异。

3.根据权利要求2所述的细胞治疗研究方法，其特征在于，所述免疫缺陷小鼠为人源化免疫缺陷小鼠。

4.根据权利要求3所述的细胞治疗研究方法，其特征在于，所述人源化免疫缺陷小鼠为NOD-SCID-IL2Rg-/-(NSI)小鼠。

5.根据权利要求2所述的细胞治疗研究方法，其特征在于，所述小鼠脑瘫模型的构建方法包括以下步骤：

(1)用3.5％异氟醚麻醉幼小鼠，并以1.5％异氟醚维持其麻醉状态下，切开皮肤，剖离其左颈总动脉后用普理灵缝合线永久结扎，缝合皮肤切口；

(2)而后幼小鼠被送回母亲共处1小时，然后放置在37℃的有机玻璃缺氧室中，将含8.0％氧的氮氧混合物以1.0～2.0L/min的流速注入缺氧室内0.5小时；

(3)然后，幼小鼠再次被送回笼子，由它们的母亲喂养。

6.根据权利要求2所述的细胞治疗研究方法，其特征在于，所述分析包括转棒实验分析、旷野实验分析或步态分析。