[发明专利]HIST1H2BC应用于活动性结核鉴别诊断

说明书

本发明属于生物医药领域，涉及一种分子标记物HIST1H2BC在诊断结核病中的应用。本发明提供检测分子标记物HIST1H2BC表达水平的试剂在制备诊断结核病的试剂盒的应用。

技术领域

本发明属于生物医药领域，涉及一种分子标记物HIST1H2BC在诊断结核病中的应用。

背景技术

结核病(Tuberculosis，TB)是由结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,M.tb)感染引发的一种严重威胁人类健康的慢性传染性疾病，全球将近四分之一的人感染结核分枝杆菌，并长期处于潜伏感染状态，其中5％～10％可能会在一生中发生活动性结核病。由于结核分枝杆菌的自身的细胞壁较厚、脂肪酸含量较高、细胞内寄生等生物学特点，结核病早期以及快速诊断的灵敏度和检出率均较低，一直未有突破进展。目前活动性结核病的诊断主要依据病原学检测和患者影像学诊断。病原学检测被认为是结核诊断的“金标准”，包括患者痰涂片、痰培养以及分子生物学检测方法，主要针对宿主标本中存在的结核分枝杆菌活菌及其基因组份进行检测；然而，目前菌阳结核比例只占临床结核病例的30－40％，仍有过半的病例无法应用病原学结果做出诊断。另一方面，影像学诊断虽然快捷、灵敏，但存在假阳性高、无法区分肺结核与其他肺部感染的缺陷。而针对宿主的免疫反应检测方法，如结核菌素皮肤试验(tuberculin skin test，TST)和γ干扰素释放试验(interferon gamma release assays，IGRA)只能判定结核菌感染而无法确定是否为活动性结核，且无法区分结核与非结核分枝杆菌感染。因此，迫切需要新的诊断方法，实现结核病的早期和快速诊断，从而达到有效治疗个体，控制、消灭结核传播的目标。

目前结核病毒诊断方法有：(一)病原学检查：痰涂菌检查和痰结核菌检查简便易行，准确性较高，痰中查出结核菌，就能确诊患了结核病。一般初次就诊要查三个痰标本，即夜间痰、清晨痰和即时痰。它虽然是诊断肺结核“金指标”但诊断率低，培养周期长。痰结核菌培养，结果可信度高，并能做结核菌药敏试验，但需时6－8周，应用受到限制。(二)Ⅹ射线检查：胸部Ⅹ线检查可以早期发现结核病，而且可以确定病灶的部位、性质、范围，了解发病情况及用于治疗效果的判断，并且开展方便，病人乐于接受。胸部CT可以发现较小的或隐蔽部位的病变，可以弥补一般Ⅹ线检查的不足。但容易与其他肺部疾病混淆，需要专业医生确证。(三)肺结核病免疫学诊断：1.常用的有结核菌素纯蛋白衍化物(PPD) 试验，该试验阳性是感染过结核菌的证据之一，但是假阳性率高，容易误诊。2. 血中、痰中结核抗体检测阳性也有助于诊断，也容易出现假阳率。3.BACTEC法测结核分枝杆菌的代谢物，一般两周可分离出分枝杆菌，但菌量多少能影响阳性结果出现的天数。5.聚合酶链反应(PCR)，优点是敏感性可达98％-100％，缺点是特异性较差。(四)其他检查：只能作为辅助诊断，不能作为诊断依据。1.纤维支气管镜检查，可以直接观察或间接判断支气管、肺内病变，并且有活组织检查、灌洗、录像、拍摄气管内照片等功能，对于诊断和鉴别诊断特别有用。2. 胸腔镜和纵隔镜检查，均可用于观察胸腔、纵隔内肿大淋巴结，并可取出活组织检查以利诊断和鉴别诊断。3.超声波检查，主要用于胸腔积液的诊断和鉴别诊断。

HIST1H2BC，也称H2BC4基因,编码组蛋白H2B1 I型－C/E/F/G/I簇生蛋白(H2Bclustered histone 4)，其为核小体的核心组份。该基因为已知基因，序列见参考文献(Taylor,T.D.et al.Human chromosome 11DNA sequence and analysis includingnovel gene identification.2006，Nature 440,497-500。)组蛋白在转录调控、DNA修复、DNA复制和染色体稳定的过程中扮演重要角色。DNA 组装也是要通过组蛋白的后转路修饰完成的。该基因参与机体的抗细菌体液免疫反应、粘膜的天然体液反应等过程。曾有乳房外佩吉特氏病病人中发现有此基因突变，但也不能证明和此病相关；在成纤维母细胞培养时，血清缺乏会导致此基因的高表达；目前尚未发现其与结核病相关的研究报道。

发明内容