[发明专利]逆转录病毒载体、应用及CAR-T细胞杀伤功能评估方法在审
| 申请号： | 202011034059.4 | 申请日： | 2020-09-27 |
| 公开（公告）号： | CN112111522A | 公开（公告）日： | 2020-12-22 |
| 发明（设计）人： | 汪晨;张海 | 申请（专利权）人： | 南京艾德免疫治疗研究院有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/867 | 分类号： | C12N15/867;C12N5/10;C12N15/23 |
| 代理公司： | 北京轻创知识产权代理有限公司 11212 | 代理人： | 潘云峰 |
| 地址： | 210000 江苏省南京市浦口区江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 逆转录 病毒 载体 应用 car 细胞 杀伤 功能 评估 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一种逆转录病毒载体，其特征在于，包含编码IFN-γ启动子和荧光蛋白基因的序列，所述荧光蛋白基因受所述IFN-γ启动子的转录控制。
2.根据权利要求1所述的逆转录病毒载体，其特征在于，所述IFN-γ启动子序列为SEQID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.4所示序列中的一种。
3.根据权利要求1所述的逆转录病毒载体，其特征在于，所述荧光蛋白基因为GFP、EGFP、RFP、mcherry中的一种或多种组合。
4.根据权利要求1所述的逆转录病毒载体，其特征在于，不包含增强子。
5.根据权利要求1所述的逆转录病毒载体，其特征在于，所述逆转录病毒为慢病毒。
6.一种包括如权利要求1至5任一所述的逆转录病毒载体的CAR-T细胞。
7.一种如权利要求1至5任一所述的逆转录病毒载体在CAR-T细胞中的应用。
8.一种如权利要求1至5任一所述的逆转录病毒载体在CAR-T细胞杀伤功能评估中的应用。
9.一种CAR-T细胞杀伤功能评估方法，其特征在于：包括如下步骤：
S1利用如权利要求1至5任一所述的逆转录病毒载体感染CAR-T细胞；
S2将步骤S1得到的CAR-T细胞与靶细胞共培养；
S3取共培养后的细胞进行流式细胞分析，检测荧光蛋白基因表达情况。
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