[发明专利]一株耐高温沙门氏菌噬菌体RDP-SA-18056及其微胶囊的制备工艺

说明书

本发明公开了一株耐高温沙门氏菌噬菌体RDP‑SA‑18056及其微胶囊的制备工艺，其宿主为沙门氏菌S7，该噬菌体在双平板上能形成直径在2mm‑4mm的噬菌斑；透过电镜观察，该噬菌体有一个多面体立体对称的头部，包裹着核酸，直径约50nm，有一个长约200nm的尾，有尾鞘，颈部连着头部和尾部；为有尾病毒目长尾病毒科。保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物学中心，保藏日期为2020年01月19日，保藏编号CGMCC No.19293。该噬菌体对沙门氏菌具有强烈的裂解作用，为工业化生产噬菌体及用于禽源沙门氏菌病的防治及环境消毒提供了噬菌体来源。该噬菌体具有良好的温度和酸碱耐受性；该噬菌体微胶囊的制备工艺简单、效率高、成本低，提高了噬菌体的药用价值。

技术领域

本发明涉及微生物领域，特别是涉及一株耐高温沙门氏菌噬菌体RDP-SA-18056及其微胶囊的制备工艺。

背景技术

沙门氏菌属（Salmonella）是一类寄生在人和动物肠道内的无芽孢直杆菌，它的血清型超过2500个，其中许多血清型菌可以在动物和人之间交叉感染，大多数血清型具有很强的致病性，对畜禽饲养业和人类造成了巨大的危害。由于抗生素在养禽业的滥用，使沙门菌的耐药性越来越强，多重耐药菌株不断增加，并根据使用抗生素种类的不同，沙门菌的耐药谱也不断发生变化。近年来，耐药性的沙门菌已经成为鸡沙门菌病的主要致病菌，

沙门氏菌可以通过食物污染感染人和动物，可引起胃肠炎、菌血症和肠外感染等疾病，是重要的肠道致病菌禽源沙门氏菌病是严重危害我国禽业的重要传染病，可造成种蛋孵化率、雏鸡存活率和鸡生产性能下降等问题。鸡白痢沙门氏菌是禽源沙门氏菌中的一种，在各种年龄鸡只都可发生。雏鸡发病呈急性败血症经过，而成年鸡发病则以隐形感染为主。

噬菌体广泛存在于自然环境中，种类繁多，特异性强，绿色安全，其对细菌裂解的特异性和高效性再度引起人们对噬菌体的的关注。

本发明通过沙门氏菌噬菌体的分离，进而分离出一株耐高温沙门氏菌噬菌体，并研究了其生物学特性，扩充了噬菌体储备库为开发治疗鸡白痢的抗生素替代品奠定了基础。

发明内容

本发明的目的之一在于提供一株治疗禽源沙门氏菌病的，且安全可靠的耐高温沙门氏菌噬菌体RDP-SA-18056，提供一株生产该噬菌体的病原菌S7，同时提供了一种该噬菌体的分离方法。该噬菌体RDP-SA-18056保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，北京市朝阳区北辰西路1号院3号，保藏日期为2020年1月19日，保藏编号CGMCC No.19293。

本发明的另一目的在于提供该噬菌体在治疗禽源沙门氏菌病中的应用， RDP-SA-18056具有较高的温度耐受性和较宽的酸碱耐受范围，效价较高，安全有效，有利于工业化生产，结合该噬菌体增值的特点，提供了一种该噬菌体RDP-SA-18056微胶囊的制备工艺。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一株耐高温沙门氏菌噬菌体RDP-SA-18056，其宿主为沙门氏菌S7，该噬菌体在双平板上能形成直径在2mm-4mm的噬菌斑；透过电镜观察，该噬菌体有一个多面体立体对称的头部，包裹着核酸，直径约50nm，有一个长约200nm的尾，有尾鞘，颈部连着头部和尾部；为有尾病毒目长尾病毒科，保藏编号CGMCC No. 19293。

进一步地，该噬菌体RDP-SA-18056基因长度为42960bp，不具有毒力基因和溶原性基因。

进一步地，该噬菌体RDP-SA-18056经65℃处理60min，效价仍保持在10¹⁰pfu/mL以上。

进一步地，该噬菌体RDP-SA-18056在pH6-9的条件下，37℃培养1h，效价仍保持在10¹¹pfu/mL以上。