[发明专利]一种检测鳞状上皮细胞癌抗原的化学发光试剂盒

说明书

本发明涉及一种鳞状上皮细胞癌抗原化学发光免疫试剂盒，包括包被抗鳞状上皮细胞癌抗原的抗体的磁珠稀释液、酶标抗体溶液和化学发光底物液，磁珠稀释液包含以下浓度组分：缓冲体系75～125mmol/L，表面活性剂10～20g/L，海藻糖30～35g/L，丙氨酸10～15g/L，Proclin 300 0.5～1g/L；磁珠稀释液的pH值为7.0±0.05。本发明通过在通过优化磁珠稀释液的缓冲体系，抗体包被磁珠周围形成水膜，降低磁珠的非特异性吸附，减少对免疫反应的干扰，从而降低SCC背景噪音。

技术领域

本发明涉及生物物质检测技术领域，尤其涉及一种检测鳞状上皮细胞癌抗原的化学发光试剂盒。

背景技术

目前已知的鳞状上皮细胞癌抗原测定方法有放射免疫法(RIA)、酶联免疫吸附法(ELISA)、胶乳增强比浊法和化学发光免疫法(CLEIA)等。放射免疫法具有准确性高的优点，但是该方法使用了放射性物质，有辐射影响，实验废物需要专门的实验室，成本高且半衰期短，目前已经逐渐淘汰。酶联免疫吸附法由于其方法学的局限性，存在检测时间长，操作复杂，特异性差，灵敏度低，重复性差等缺点。胶乳增强比浊法操作简单快速，但灵敏度低，低值重复性差。而化学发光免疫法是将高灵敏度的化学发光技术与高特异性的免疫反应结合，具有操作简便，线性范围宽，灵敏度高，精密度高，重复性好等优点，现有技术中是将抗鳞状上皮细胞癌抗原的抗体包被于磁性微球表面，便于在反应和检测中分离和清洗，可重复多次使用，但是其包被有抗鳞状上皮细胞癌抗原的抗体在制备试剂盒中，对其使用的悬浮液，往往具有较高的背景噪音，致使其检测灵敏度下降。

发明内容

有鉴于此，本发明提供一种鳞状上皮细胞癌抗原化学发光免疫试剂盒，包括包被抗鳞状上皮细胞癌抗原的抗体的磁珠、磁珠稀释液、酶标抗体溶液和化学发光底物液；

所述磁珠稀释液包含以下浓度组分：

缓冲体系75～125mmol/L，

表面活性剂10～20g/L，

海藻糖30～35g/L，

丙氨酸10～15g/L，

Proclin 300 0.5～1g/L；

所述磁珠稀释液的pH值为7.0±0.05。

进一步的，所述缓冲体系选自N-(2-乙酰氨基)-2-亚氨基二乙酸，N-(2-乙酰胺)-2-氨基乙磺酸，3-(N-吗啉基)-2-羟基丙磺酸，N，N-双(2-羟乙基)-2-氨基乙磺酸或3-[N,N-二(羟乙基)氨基]-2-羟基丙磺酸中的一种。

进一步的，所述包被抗鳞状上皮细胞癌抗原的抗体磁珠为经过低聚半乳糖修饰的磁珠通过偶联抗鳞状上皮细胞癌抗原的抗体a得到。

具体的，所述低聚半乳糖修饰的磁珠的制备步骤包括：将分散相分散于连续相中，通过采用膜乳化法进行乳化，在加入磁珠进行交联，即可得到低聚半乳糖修饰的磁珠；其中，分散相为低聚半乳糖的溶液，其中包含2％v/v的醋酸；连续相包含液体石蜡58～60份、石油醚35～38份和乳化剂3～5份。

具体的，乳化剂为乳化矿物油。

具体的，交联剂为按照氨基醛基摩尔比为2:1加入戊二醛饱和的甲苯溶液，交联结束后，调节pH为9～10。

具体的，交联结束后得到的磁珠依次使用石油醚、乙酸乙酯、丙酮和超纯洗涤，并用硼氢化钠还原后再水洗至中性。

具体的，所述表面活性剂选自Tetronic 1307、胆酸钠、Emulgen A60、EmulgenB66、EmpigenBB detergent和Emulgen 430中的一种。

进一步的，所述的化学发光试剂盒，其特征在于，还包括校准品和质控品。